熒光素標記整合素α4β7抗體IgG
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- 公司名稱 上海譽貿實業有限公司
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- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2017/12/14 16:12:08
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熒光素標記整合素α4β7抗體IgG
DyLight594是DyLight系列熒光染料家族成員之一,zui大吸收波長593nm,zui大發射波長618nm。DyLight是是一系列非常明亮并且穩定的熒光基團,是一種新型熒光染料。具有高熒光強度,靈敏性出色,對抗光漂白的能力強,在大多數條件下都能獲得熒光圖片,PH值穩定性好,在很寬的PH值范圍內都能獲得很好的熒光信號,適合拍照,與儀器的兼容性好,發射波長與普通熒光設備的輸出波長匹配。因此可用于大部分熒光顯微鏡以及遠紅外成像系統。
TRITC(Tetramethyl Rhodamin Isothiocyanate,四甲基異硫氰酸羅丹明)為羅丹明的一種衍生物,呈紫紅色粉末,較穩定,zui大吸收光波長550nm,zui大發射光波長620nm,呈現橙紅色熒光。TRITC能與細胞內蛋白質結合,比FITC穩定性好,對pH值變化不敏感,熒光強度受自發熒光干擾小,與FITC的翠綠色熒光對比鮮明,可配合用于雙重標記或對比染色。因其熒光淬滅慢,也可用于單獨標記染色。羅丹明的衍生物還包括Rhodamine Red-X(RRX), Texas Red(TR)等。
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熒光素標記整合素α4β7抗體IgG
注意事項
1)對熒光標記的抗體的稀釋,要保證抗體的蛋白有一定的濃度,一般稀釋度不應超過1:20,抗體濃度過低,會導致產生的熒光過弱,影響結果的觀察。
2)染色的溫度和時間需要根據各種不同的標本及抗原而變化,染色時間可以從10 min到數小時,一般30 min已足夠。染色溫度多采用室溫(25℃左右),高于37℃可加強染色效果,但對不耐熱的抗原(如流行性乙型腦炎病毒)可采用0-2℃的低溫,延長染色時間。低溫染色隔夜較37℃30 min效果好的多。
3)為了保證熒光染色的正確性,*試驗時需設置下述對照,以排除某些非特異性熒光染色的干擾。
① 標本自發熒光對照:標本加1-2滴0.01mol/L,pH7.4的PBS。
② 特異性對照(抑制試驗):標本加未標記的特異性抗體,再加熒光標記的特異性抗體。
③ 陽性對照:已知的陽性標本加熒光標記的特異性抗體。
如果標本自發熒光對照和特異性對照呈無熒光或弱熒光,陽性對照和待檢標本呈強熒光,則為特異性陽性染色。
4)一般標本在高壓汞燈下照射超過3min,就有熒光減弱現象,經熒光染色的標本在當天觀察,隨著時間的延長,熒光強度會逐漸下降。