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免疫熒光（Immunofluorescence, IF）實驗方法2021/10/26
材料與儀器：免疫熒光技術是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。它是根據抗原抗體反應的原理，先將已知的抗原或抗體標記上熒光基團，再用這種熒光抗體（或抗原）作為探針檢查細胞或組織內的...
免疫熒光技術-間接法2021/10/26
材料與儀器：抗體PBS伊文氏蘭顯微鏡實驗步驟：1.標本固定后，PBS洗滌3x3分鐘；2.滴加一抗，37℃40分鐘或4℃過夜；3.PBS洗3x3分鐘；4.滴加熒光標記二抗37℃，40分鐘；5.PBS洗3...
免疫熒光技術-直接法2021/10/26
材料與儀器：抗體PBS伊文氏蘭顯微鏡實驗步驟：1.標本經固定后，PBS洗滌3×3分鐘；2.加熒光素標記的抗體，濕盒內37℃孵育50分鐘；3.PBS洗滌3×3分鐘；4.0.1%伊文氏蘭復染；5.PBS洗...
冰凍切片和石蠟切片各自的優劣之處是什么？2021/10/26
冰凍切片和石蠟切片各自的優劣之處1、從一抗的選擇方面來看。有的一抗既能做石蠟切片又能做冰凍切片，而有的一抗只能做冰凍切片，關鍵取決于所要檢測的抗原穩定性，有的抗原不穩定，經過組織固定，脫水、透明、浸蠟...
細胞不長，這些方面您注意了嗎？2021/10/25
Q1培養液pH對細胞生長的影響？答：由于大多數細胞適宜pH為7.2-7.4，偏離此范圍可能對細胞生長將產生有害的影響，目前也有些無血清培養基或者轉染用的培養基PH值會在6.5左右。因為各種細胞對pH的...
NGS建庫人都在用的文庫質量評定方法，你都知道嗎？2021/10/25
高通量測序（NextGenerationSequencing，NGS）近年來飛速發展，在各個領域已被廣泛應用。而文庫的制備是NGS技術中極為重要的步驟。所謂文庫制備（LibraryPreparatio...
病原微生物提取的方法有哪些？2021/10/25
數據統計據WHO統計，全球感染性疾病導致的患者死亡占全部死因的25%以上，在中國，感染性疾病占所有疾病的50%以上，75%造血系統腫瘤患者和50%實體腫瘤患者死于感染，膿毒癥（嚴重感染）患者病死率高達...
常見的DNA損傷類型有哪些？2021/10/25
說起DNA損傷修復，相信大家都很熟悉，但小編今日還是要跟大家再嘮嘮這個話題，講講在二代建庫中，如果DNA存在損傷，那常見的損傷類型有哪些呢？而這些損傷又是如何進行修復的呢？損傷的形成常見的DNA損傷有...
化學感受態細胞進行質粒DNA轉化的原理2021/10/25
背景介紹將質粒DNA轉化入細菌的過程稱為轉化。轉化通常有兩種方法：化學轉化法和電穿孔法。電穿孔法的轉化率高達109～1010個轉化子/μg質粒DNA，轉化率比化學轉化法高，當可能得到的每一個克隆都非常...
ELISA雙抗體夾心法2021/10/22
簡介ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體...
蛋白質免疫印跡實驗方法原理步驟及注意事項2021/10/22
蛋白質免疫印跡（WesternBlot|WB）實驗方法原理步驟及注意事項一：蛋白提取1、組織蛋白提取1）所需器材：制冰機、標記筆、兩套1.5mlEP管（最好高溫高壓處理）、一個大冰盒、一個1.5mlE...
非基因組DNA的提取2021/10/22
一、DNA提取方法簡介1、基因組DNA的提取1.1、CTAB法1.2、SDS法1.3、其它2、非基因組DNA的提取2.1、質粒DNA的提取2.1.1、堿裂解法2.1.2、煮沸法2.2、線粒體、葉綠體D...
DNA提取方法簡介2021/10/22
一、DNA提取方法簡介1、基因組DNA的提取1.1、CTAB法1.2、SDS法1.3、其它2、非基因組DNA的提取2.1、質粒DNA的提取2.1.1、堿裂解法2.1.2、煮沸法2.2、線粒體、葉綠體D...
核酸提取的方法2021/10/22
核酸是遺傳信息的載體，是最重要的生物信息分子，是分子生物學研究的主要對象，因此核酸的提取是分子生物學實驗技術中最重要、最基本的操作。核酸提取系列目錄一、DNA提取方法簡介二、DNA提取常見問題、原因分...
Southern Blot DNA印跡雜交實驗全流程2021/10/21
一、DNA的提取人和哺乳動物細胞基因組DNA的分離通常是在有EDTA、Sarkosye等一類去污劑存在下，用蛋白酶K消化細胞，隨后用FEN、LVFANG抽提，經RNase處理和純化來提取DNA。(1)...
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