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說起DNA損傷修復，相信大家都很熟悉，但小編今日還是要跟大家再嘮嘮這個話題，講講在二代建庫中，如果DNA存在損傷，那常見的損傷類型有哪些呢？而這些損傷又是如何進行修復的呢？
損傷的形成
常見的DNA損傷有兩種，一種是由DNA復制中的錯誤或DNA自發性的化學變化引起的自發性損傷，一種是由物理或化學等外界環境因素引起的被動性損傷。這些損傷如果發生在活體中，會由機體進行自發性修復，但如果損傷嚴重，不能*修復，長時間則會引起機體老化或腫瘤等疾病的發生。
在建庫過程中，我們遇到的DNA損傷多為外界環境引起的被動性損傷，如高溫，紫外照射，甲醛固定等等，而這些損傷既不是機體本身具有的，也不能通過機體自身的機制來進行修復，所以，為了獲得準確的樣本基因信息，后期的人為修復是定不可少的啦！
常見的損傷類型及修復模式
針對FFPE，cfDNA樣本，影響文庫構建的常見損傷類型可以分為：胞嘧啶脫氨，AP位點，Gap，Nick，3’端封閉等，接下來，小編對這幾種損傷進行簡單的介紹：
胞嘧啶脫氨
是指胞嘧啶的環外氨基在亞硝酸鹽等氧化劑存在的情況下發生脫落，形成尿嘧啶，原本的CG位點就變成了UG位點。修復時，新形成的尿嘧啶可被專一的N-糖苷酶切除，然后用AP核酸內切酶打開磷酸二酯鍵，進行切除修復。
AP位點
又被稱為脫嘌呤或嘧啶位點：AP核酸內切酶可識別DNA上的AP位點，切開AP位點附近的DNA鏈，然后在DNA聚合酶和DNA連接酶的作用下完成修復。
Gap和Nick均屬于單鍵斷裂
Gap和Nick均屬于單鏈斷裂的損傷類型，多由氧化或β糖苷鍵發生水解造成。在修復時，會有相應的DNA聚合酶和DNA連接酶進行損傷位點的識別與感應，完成斷裂單鏈的修復。
3‘端封閉
最后再說說3‘端封閉，一般是3‘末端被其他基團封閉造成，DNA分子不能正常進行延伸或連接反應。這種損傷類型的修復方式需要將封閉的基團切除，暴露出羥基，再由DNA聚合酶和DNA連接酶來完成修復。
圖1. DNA損傷后修復建庫示意圖
以上提到的5種損傷形式，都會影響文庫的正常構建以及樣本基因信息的準確性。
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