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轉染懸浮細胞U937人白血病細胞條件與方法2021/11/10
轉染條件：細胞數量：電訊siRNA濃度：20uM/L培養板：6孔板轉染試劑用量：10ulsiRNA用量：電訊轉染試劑：AD600150，AdvancedDNARNA轉染試劑轉染時間：15小時血清：Z7...
小鼠單核巨噬細胞白血病細胞（RAW264.7）的培養要點及高效轉染2021/11/10
小鼠單核巨噬細胞白血病細胞（RAW264.7）是通過Abelson鼠白血病病毒誘導BALB/c小鼠產生腫瘤后得到的細胞株。其在醫學研究中應用十分普遍，是許多白血病相關研究模型的常用細胞株，在微生物學、...
難轉染細胞Thp-1高效率轉染條件分享2021/11/10
Thp-1細胞高效率轉染條件分享一、轉染材料準備1.轉染試劑用量：10ul2.siRNA濃度：20um/L3.細胞密度：1*106-1*1054.轉染用培養板：6孔板5.轉染試劑：AdvancedDN...
細胞STR鑒定相關問題匯總2021/11/10
STR（ShortTandemRepeats，短串聯重復序列）分析已被國際細胞系鑒定協會（ICLAC：InternationalCellLineAuthenticationCommittee)、ATC...
初代細胞培養——消化培養法2021/11/8
材料與儀器組織Hanks培養液胰蛋白酶吸管平皿培養瓶燒杯攪拌器三角燒瓶不銹鋼篩眼科剪眼科鑷計數板實驗步驟1.準備取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘；2.布局點燃酒精燈（或煤氣燈），...
成纖維細胞生長因子誘導血管生成模型實驗2021/11/8
材料與儀器成纖維細胞肝素PBS牛血清蛋白FGFCO2培養箱96孔培養板光學顯微鏡酶標儀實驗步驟一、成纖維細胞生長因子和肝素誘導基底膜蛋白提取物內的血管生成模型1.Matrigel為一種基底膜提取物，主...
背根神經節細胞的原代培養實驗步驟2021/11/8
材料與儀器孵化8-12d的雞胚。孕15d及新生1-3d的大、小鼠仔鼠含10%胎牛血清的DMEM培養基神經元維持培養基(Neurobasal+B27+谷氨酰胺+20ngmlNGF)10µM阿...
酵母和細菌蛋白質的代謝放射標記的方法2021/11/8
材料與儀器細胞基本培養基實驗步驟1.接種細胞于只含有必需氨基酸和輔因子的已知成分的基本培養基，于合適溫度中度振蕩培養過夜。2.用新鮮的基本培養基稀釋培養物，繼續溫育至107細胞/ml（酵母）或對數期中...
用[35S]蛋氨酸和[35S]半胱氨酸標記哺乳動物細胞的方法2021/11/8
材料與儀器細胞培養基實驗步驟1.制備活躍生長著的細胞。從單層培養細胞（約鋪滿75%表面積）中吸去培養基。用預熱至37℃的無血清培養基沖洗兩次（培養基中應該不含蛋氨酸和半胱氨酸）。對于懸浮培養細胞，通過...
成纖維細胞飼養層實驗步驟2021/11/5
材料與儀器鏈酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmolLEDTA受精后8h的胚胎FBSLDF基礎培養液LDF原代培養液LDF維持培養液D培養液Holtfreter緩沖液培養瓶實驗步驟鱒魚胚胎...
玻璃器皿的準備和滅菌步驟2021/11/5
材料與儀器消毒劑（次氯酸鹽）清潔劑浸泡池試管刷不銹鋼籃子鋁箔無菌指示器無菌指示膠帶或塞滅菌烤箱實驗步驟一、玻璃器皿的收集和清洗1.玻璃器皿用后要立即將其收集到含有消毒劑（次氯酸鹽，用清潔劑稀釋，最少應...
報告基因：β-半乳糖苷酶的原位染色實驗方法2021/11/5
材料與儀器β-gal表達質粒轉染細胞D-PBSA染色液6孔培養板恒溫箱倒置顯微鏡實驗步驟一、材料非消毒物品1.D-PBSA2.底物：X-gal（nvitrogen），以二甲基甲酰胺配成20mg/mL，...
表皮角質形成細胞模型構建實驗方法2021/11/5
材料與儀器皮膚組織熱解素胰蛋白酶SKDM角質形成細胞生長培養液D-PBSAEDTA分析級甘油dispase低溫保存管尼龍網離心管細胞過濾器手術刀彎鑷實驗步驟一、材料無菌實驗前3天制備飼養層（見方案23...
白細胞分類計數實驗步驟2021/11/5
材料與儀器推玻片一塊干凈玻片數塊消毒的針頭75%酒精棉球蠟筆擦鏡紙顯微鏡瑞氏染液蒸餾水顯微鏡油二甲苯實驗步驟一、血涂片制作1.以75%酒精棉球消毒指頭，用消毒的針頭刺進局部，先拭去第一滴血，然后取血一...
學會這6步，輕松搞定transwell實驗2021/11/2
做腫瘤研究的人，很少有不知道transwell實驗的，它是用來研究腫瘤細胞的遷移侵襲轉移情況的一種簡便快捷的實驗方法，還可以構建兩種細胞的共培養體系以及趨化性試驗。今天咱們就來講講怎么做腫瘤細胞的侵襲...
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