木質(zhì)素（Lignin）含量試劑盒說明書

微量法 100 管/96 樣

木質(zhì)素含量試劑盒 其他系列

正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義：

木質(zhì)素是構(gòu)成植物細(xì)胞壁的成分之一，是由聚合的芳香醇構(gòu)成的一類物質(zhì)，存在于木質(zhì)組織中，主要作用是通過形成交織網(wǎng)來硬化細(xì)胞壁。木質(zhì)素主要位于纖維素纖維之間，起抗壓作用。

測定原理：

木質(zhì)素中的酚羥基發(fā)生乙酰化后在 280nm 處有特征吸收峰，280nm 的吸光值高低與木質(zhì)素含量正相關(guān)。

試劑組成和配制：

自備儀器和用品：

天平、40 目篩，玻璃試管、燒杯、離心機(jī)，恒溫水浴鍋、封口膜、烘箱、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板(UV 板)、高lu酸，濃liu酸。

樣品處理：

樣品 80℃烘干至恒重，粉碎，過 40 目篩，稱取約 2mg（記為W）于 10ml 玻璃試管中（務(wù)bi用玻璃試管，不可用Ep 管）。

測定步驟：

于 10ml 玻璃試管中，用封口膜密封，充分混勻，80℃水浴 40min，每隔 10min 震蕩一次，然后自然冷卻

充分混勻

取 200μl 于微量石英比色皿/96 孔板，測定 280nm 處吸光值A(chǔ)。分別記為 A 空白管和A 測定管，ΔA=A

測定管-A 空白管

計(jì)算公式：

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.0347x+0.0068，R2=0.9889

Lignin（mg/g 干重）= (ΔA-0.0068)÷0.0347×V 反總×10-3÷W×T=0.0294×(ΔA-0.0068) ÷0.002×50

V 反總：反應(yīng)總體積：1.02ml；W：樣本質(zhì)量，g；T：稀釋倍數(shù)

注意事項(xiàng)：

1、試劑一有毒性，請操作時做好防護(hù)措施，加熱前必須用封口膜密封，以防氣體溢出。

2、加熱過程中有劇烈反應(yīng)，震蕩時輕搖，以免壓力過大噴出造成人身傷害。

3、試劑三具有強(qiáng)刺激性，建議操作過程全部在通風(fēng)櫥子操作。

4、取上清加試劑三步驟根據(jù)自己樣品乙酰化程度，試劑三的用量可調(diào)整，保證吸光值在 0.1-0.8 之間即可，并在公式中參與計(jì)算。

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