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腫瘤相關蛋白翻譯后修飾研究中的應用2021/9/7
腫瘤發生與發展過程中，除了表達差異，很多蛋白質的功能受到翻譯后修飾的調控。利用蛋白質組學的方法，可對腫瘤相關蛋白質的修飾進行的定量及定性分析，為激酶信號通路、組蛋白修飾等研究提供基礎。Kim等在201...
在腫瘤相關蛋白定性研究中的應用2021/9/7
利用shotgun的蛋白組技術，可以實現對復雜樣品中大量蛋白質的定性分析，進而為闡明腫瘤相關蛋白質的相互作用、信號通路組成及蛋白質亞細胞定位提供依據。Dawson等人發表于2011年《Nature》上...
在腫瘤相關蛋白定量研究中的應用2021/9/7
利用非標記（2D，Labelfree）及標記（DIGE、SILAC、iTRAQ）定量的蛋白組技術與方法，可以實現對不同樣品中的大量蛋白進行大規模的相對定量研究，進而為相關具體機制的深入闡明提供基礎和思...
蛋白質組學生物信息學的作用和影響2021/9/6
蛋白質組學本身是一門大科學，其產生的數據量是十分龐大。如何將大量的蛋白質組學數據進行儲存和加工，使之轉變成可以理解的具有生物學意義的結果比如蛋白質名稱，多肽序列，蛋白質結構，蛋白質差異等；如何使蛋白質...
認識蛋白質組學鑒定技術2021/9/6
在蛋白質組學研究流程中，蛋白質鑒定技術是最關鍵的部分。在蛋白質組分離技術方面還有凝膠電泳技術和色譜技術的選擇，而蛋白質鑒定技術方面卻只是生物質譜技術（BioMassSpectrometry）一枝獨苗。...
【蛋白技術】蛋白標簽TAG是什么高大上的東西？2021/9/3
首先，蛋白標簽（proteintag）是什么？蛋白標簽（proteintag）是指利用DNA體外重組技術，與目的蛋白一起融合表達的一種多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表達、檢測、示蹤和純化等。蛋白標簽大...
酵母雜交實驗——從一無所知到略知一二2021/9/3
低分文章要想逆襲，實現向高分文章的跳躍，就一定少不了要將細胞豪門中分子間錯綜復雜的關系屢屢清楚。為了找尋能讓自家目的蛋白榮登科研“頭條榜”的“花邊新聞”，一眾科研者可謂是操碎了心。慶幸的是，酵母雙雜交...
Get到這幾招，方可輕松搞定SDS-PAGE電泳實驗！2021/9/3
SDS-PAGE作為一個老生常談的實驗，早已廣為科研者所知。然而該實驗雖然基礎，但是細節繁瑣，耗時長久，光是配制試劑就要花費2個小時左右。而這還只是Westernblot（WB）的第一步，也使得完成W...
【技術】提升蛋白質樣品質量，三招就足夠！2021/9/3
在制備中丟失的蛋白質是永遠不可能在后面的實驗中彌補回來的。蛋白質樣品制備是許多實驗重要的第一步。為什么要進行樣品的制備？電泳的目的不就是分離嗎？剛剛接觸時有這樣的疑問。然并卵，由于雙向電泳一般只能分辨...
真核細胞轉染操作方法2021/9/3
一些真核蛋白在原核宿主細胞中的表達不但行之有效而且成本低廉，然而許多在細菌中合成的真核蛋白或因折疊方式不正確，或因折疊效率低下，結果使得蛋白活性低或無活性。不僅如此，真核生物蛋白的活性往往需要翻譯后加...
細胞轉染操作方法及各方法比較2021/9/2
轉染，是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。轉染大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍...
尋找轉錄因子與基因啟動子的結合點2021/9/2
經過EMSA、DNase1足跡實驗、甲基化干擾實驗、體內足跡實驗、Chip-on-chip等方式，終于落實了轉錄因子跟基因的關系，繼續探索轉錄因子跟該基因的啟動子的結合位點在哪里？第一步，要確定到啟動...
關于lncRNA，你必須知道的秘密（內附彩蛋）2021/9/2
lncRNA一開始被認為是由RNA聚合酶II轉錄形成的轉錄副產物，并沒有生物學功能，只是一種轉錄噪音（遺傳噪音）。然后，現在越來越多的研究發現lncRNA有及其重要的生理功能，這些功能包括：遺傳印記（...
IncRNA系列：lncRNA的生物學功能介紹2021/9/2
（一）lncRNA對于細胞周期及凋亡的調控作用有研究報道，lncRNA可以通過調節細胞周期和凋亡的方式，來影響細胞的增殖。例如，Gas5（growtharrest-specific5，非編碼RNA）在...
【專欄】一文總結LncRNA研究思路2021/9/2
lncRNA參與了X染色體沉默，基因組印記以及染色質修飾，轉錄激活，轉錄干擾，核內運輸等多種重要的調控過程，很多人看到lncRNA的熱點還沒有過去，經常會問如果沒有相關的工作基礎，如何開始lncRNA...
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