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上海徠同生物科技有限公司

免疫共沉淀Co-IP實驗介紹

時間:2021-11-26閱讀:984
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免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation, Co-IP



蛋白質是細胞活性和功能的執行者,且蛋白質是依靠蛋白間相互作用執行功能的,因而研究蛋白的相互作用對于研究細胞活性和功能、解釋生命過程和現象具有重要意義。

 



實驗原理



免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CoIP)是研究蛋白-蛋白間相互作用的經典方法,屬于免疫沉淀技術的一類,常被用于鑒定特定蛋白復合物的中未知蛋白組分。免疫共沉淀的設計理念是,假設一種已知蛋白是某個大的蛋白復合物的組成成員,那么利用這種蛋白的特異性抗體,就可能將整個蛋白復合物從溶液中“拉"下來(常說的“pull-down"),進而可以用于鑒定這個蛋白復合物中的其他未知成員。免疫共沉淀的特點可以概括為兩點,第一是天然狀態,第二是蛋白復合物。





實驗方法



1. 預清洗beads。

2. 取蛋白樣品分成input,igG組和目標抗體組進行IP。

3. 取出預清洗的beads. 加入 IP用的目標抗體和igGrotator進行IP反應過夜。

4. IP過夜后收取蛋白

5. 通過SDS-PAGEWestern Blot或質譜進行檢測。

 



結果展示





 

實驗周期及交付標準



1. 實驗周期:3-5

2. 交付標準:完整實驗報告(試劑、耗材、實驗步驟)、原始數據等





需確認信息



1. 目的蛋白及信息

2. 樣本種屬及類型

3.是否提供一抗

 

 


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