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從原培養容器中分離細胞操作流程2017/3/9
細胞系從基層迅速分離細胞，且保持細胞完整性的一般步驟。這一步驟并不意味著對于所有細胞系的廣泛應用，每一種系統*條件和施用濃度應該根據經驗加以確定。再次培養時檢測細胞的活性。細胞的活率應該超過90%對于...
成纖維細胞排除法操作流程2017/3/7
1.原代細胞機械刮除法：是用不銹鋼絲末端插有橡膠刮頭(用膠塞剪成三角形插以不銹鋼絲)、或裹少許脫脂棉制成，裝入試管中高壓滅菌后備用(也可用特制電熱燒灼器刮除)。刮除程序為：(1)標記：鏡下觀察，用不脫...
對淋巴細胞系進行體外刺激預孵育、或板內同步刺激培養2017/3/2
1、將抗原和淋巴細胞系在體外混合，刺激并預孵育，是通用的方法。預孵育的淋巴細胞，在置入ELISPOT板之前應使用復溫到37℃的培養液清洗細胞1-2次。置入ELISPOT板以后通常在37℃培養5～6小時...
細胞電穿孔轉染操作步驟2017/2/28
原代細胞對于細胞轉染而言，目前主要是轉染試劑(多為脂質體)的天下。磷酸鈣轉染的方法雖說有些out，但有些細胞還就認準這一套。不過，對于某些淋巴細胞而言，化學方法怎么都不奏效，那我們只能采取強硬手段，用...
植物細胞質壁分離技術分析2017/2/23
(1)原代細胞質壁分離法：成長的植物細胞一般具有中央液泡，在中央液泡和細胞壁之間為細胞質的薄層及其內外膜——液泡膜和質膜。液泡中的胞液具有一定的溶質勢(或稱滲透勢)，而活的原生質特別是液泡膜和質膜則具...
動物細胞培養技術研究開發和工業化2017/2/21
動物細胞培養技術研究開發和工業化動物細胞株（雜交瘤細胞、CHO細胞、昆蟲細胞等）大規模培養技術及其生物反應器工程可廣泛應用于抗體、基因重組蛋白質藥物、病毒疫苗等生物技術產品的研究開發和工業化，長期以來...
人類體細胞染色體標本制備實驗原理和操作步驟2017/2/16
人類體細胞染色體標本制備實驗原理和操作步驟實驗原理染色體是在顯微鏡下可見原代細胞有絲分裂過程中出現的結構。因此，必須獲得染色體標本才能進行檢查分析，通常情況下，都是利用外周血淋巴細胞進行核型分析。正常...
培養原代細胞時哪些問題需要注意2017/2/14
培養原代細胞時哪些問題需要注意1.原代細胞用1640加10%胎牛血清，有的種系用DMEM.血清要求質量較高，在普通血清中細胞生長不太好。1640用雙蒸水溶解，按說明加入碳酸氫鈉。2.培養液中應加入HE...
造血干細胞的基本特性2017/2/9
造血干細胞的基本特性造血干細胞的多向分化潛能使造血干細胞分化為各類祖細胞系,祖細胞又可以分化為各種類型的血細胞。在造血干細胞發育、成熟的過程中,除了分化為成熟的細胞,部分細胞會衰老、死亡。為了維持終生...
雜交瘤細胞技術分析2017/2/7
雜交瘤細胞技術分析克隆化的細胞可以在體外進行大量培養，收集上清液而獲得大量的單一的克隆化抗體。不過體外培養法得到的單克隆抗體有限，其不能超過特定的細胞濃度，且每天要換培養液。而體內雜交瘤細胞繁殖可以克...
體外培養的細胞系差異和分化2017/1/21
體外培養的細胞系差異和分化1、差異：細胞系離體后，失去了神經體液的調節和細胞間的相互影響，生活在缺乏動態平衡的相對穩定環境中，日久天長，易發生如下變化：分化現象減弱；形態功能趨于單一化或生存一定時間后...
選購細胞株需要考慮哪幾個因素2017/1/19
選購細胞株需要考慮哪幾個因素1、細胞株的生物等級，由于有些細胞株及菌株屬于管制品，所以從國外購貨比較麻煩。2、報關時盡量提供比較充足的證明材料，以免擔擱時間而導致干冰揮發完細胞株死亡，甚至于被退回給發...
原代細胞生物學從哪幾個方面學習2017/1/17
原代細胞生物學從哪幾個方面學習*、認識原代細胞生物學課程的重要性，正如原子是物理性質的zui小單位，分子是化學性質的zui小單位，細胞是生命的基本單位。50年代以來諾貝爾生理與醫學獎大都授予了從事細胞...
原代細胞HEPES緩沖液的使用方法及配制2017/1/12
原代細胞HEPES緩沖液的使用方法及配制(1)HEPES可按所需的濃度直接加入到配制的培養液中，再過濾除菌。每1000ml培養液中加入2.38克HEPES，待溶后用lNNaOH調pH至7.2，濾過除菌...
培養細胞無菌操作注意事項2017/1/10
培養原代細胞無菌操作注意事項1、操作原代細胞進行培養時，動作要準確敏捷，但又不必太快，以防空氣流動，增加污染機會。不能用手觸及已消毒器皿，如已接觸，要用火焰燒灼消毒或取備品更換。為拿取方便，工作臺面上...
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