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不同細胞培養基的除菌方式及注意事項2017/5/4
細胞系培養基滅菌的方式分為高壓滅菌和膜過濾除菌，不同的培養基由于其營養成份不同，滅菌方式也可能不同。絕大多數細胞培養基不適宜高壓滅菌。因為高壓滅菌易破壞細胞培養基中的一些成份，如某些維生素等，因此，在...
人外周T細胞的分離與鑒定2017/4/27
材料：淋巴細胞株懸液、1%SRBC懸液、滅活之小牛血清、離心管、試管、吸管、載玻片、0.8%戊二醛、瑞氏染液。方法（1）取上述配好之淋巴細胞懸液0.1ml于潔凈小試管中，加入1%SRBC懸液0.1ml...
原代細胞培養實驗器具清洗步驟2017/4/25
原代細胞實驗器具清洗l玻璃類1、主要有：培養瓶，血清瓶，小青瓶，移液管，離心管，試管，培養皿等。2、清洗步驟：泡在含有洗潔凈的自來水中→撈出來用毛刷將實驗器具各個面刷洗至少25遍→自來水沖洗25遍→過...
影響哺乳動物細胞復蘇的因素2017/4/20
影響哺乳動物原代細胞復蘇的因素包括：（a）細胞類型，（b）生長階段，（c）細胞處于細胞周期的哪個階段，（d）終懸液中的細胞數量和濃度。可通過優化以上因素來提高復蘇細胞活力，另外，還需考慮凍存保護劑的特...
神經細胞分散培養2017/4/18
（一）細胞系選材常用胚胎動物或新生鼠神經組織。雞胚常用胚齡6-8d，新生鼠或胎鼠（12-14d）或人胚胎。不過也有認為與組織相關。如大白鼠胚胎以19d為宜，小鼠以18d為宜，大鼠紋狀體以10d為宜；若...
巨核細胞基本生理功能分析2017/4/13
巨核細胞株雖然在骨髓的造血細胞中為數zui少，僅占骨髓有核細胞總數的0.05%，但其產生的血小板卻對機體的止血功能極為重要。每個巨核細胞均可產生1000-6000個血小板。生成血小板的巨核細胞也是從骨...
原代細胞核的分離提取2017/4/11
(一)原代細胞操作步驟1．用頸椎脫位的方法處死小白鼠后，迅速剖開腹部取出肝臟，剪成小塊(去除結締組織)盡快置于盛有0.9％NaCl的燒杯中，反復洗滌，盡量除去血污，用濾紙吸去表面的液體。2．將濕重約1...
程序降溫盒提高細胞凍存的存活率的方法2017/4/6
1.細胞系實驗室凍存盒平時放4度，需要凍細胞時直接拿出來用就可以了。第二天轉移至液氮，貴重的細胞盡快轉移，不然會影響復蘇成活率的。一般是用5次就更換一下異丙醇。現在也有一些商品化凍存液可以直接丟進-8...
原代細胞培養玻璃器皿的清洗2017/4/1
①原代細胞浸泡：新購進的玻璃器皿常帶有灰塵，呈弱堿性，或帶有鉛、碑等有害物質，故先用自來水浸泡、水洗，然后再用2%~5%鹽酸浸泡或煮沸30min，水洗。要領：培養用后的玻璃器皿要立即泡入清水中，使下道...
原代細胞線粒體膜勢能的檢測2017/3/30
原代細胞線粒體在細胞凋亡的過程中起著樞紐作用，多種細胞凋亡刺激因子均可誘導不同的細胞發生凋亡，而線粒體跨膜電位的下降，被認為是細胞凋亡級聯反應過程中zui早發生的事件，它發生在細胞核凋亡特征(染色質濃...
哺乳動物轉錄調控原理分析2017/3/28
細胞系RNA聚合酶II是三大RNA聚合酶之一，存在于基因轉錄裝置的核心位置，編碼蛋白質基因的轉錄受到RNA聚合酶的調控。RNA聚合酶解開DNA雙鏈，沿著一條鏈移動。在移動過程中，它們一邊“解讀”DNA...
過氧化物酶標記測定法原理2017/3/23
腫瘤細胞原理：脫氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,可以摻入到凋亡細胞雙鏈或單鏈DNA的3-OH末端,與dATP形成異多聚體,并可與連接了報告酶(...
新生小鼠頸上交感神經元分散細胞培養2017/3/21
原代細胞交感神經系統在維持機體的正常功能和對環境的適應性反應中起著十分重要的作用。交感神經細胞培養特別有助于神經細胞發育和可塑性研究，利用體外培養系統可進行交感神經細胞的發生、死亡、形態和生化發育、遞...
常見的細胞因子受體檢測的方法介紹2017/3/16
（一）活細胞系吸收試驗原理將過量的待測細胞與*細胞因子共孵育，若細胞膜表面存在相應的細胞因子受體即可結合細胞因子，通過測定前、后細胞因子生物活性的對比情況可推測待測細胞表面細胞因子受體是否存在。方法1...
原代細胞計數的操作步驟2017/3/14
（一）原代細胞計數1、將血球計數板及蓋片用擦試干凈，并將蓋片蓋在計數板上。2、將細胞懸液吸出少許，滴加在蓋片邊緣，使懸液充滿蓋片和計數板之間。3、靜置3分鐘。4、鏡下觀察，計算計數板四大格細胞總數，壓...
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