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漲知識 | qPCR專場一：如何做好擴增片段和引物設(shè)計？
熒光定量PCR是實驗室中出鏡率非常高的一種檢測方法。該方法通過在PCR體系中添加熒光基團來記錄DNA產(chǎn)物的累積情況，從而達到對PCR過程進行實時監(jiān)控的目的，并且可以通過數(shù)據(jù)分析計算出起始模板量，這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源。熒光定量PCR實驗因為靈敏度高所以經(jīng)常是差之毫厘謬以千里，所以在實驗過程中，我們需要注意諸多細節(jié)，謹慎操作。小伙伴們看到這里就要著急了，我怎樣才能做好qPCR實驗，拿到實驗結(jié)果，發(fā)表高分文章。對于熒光定量PCR數(shù)據(jù)的準確性而言，反應效率至關(guān)重要。在理想狀態(tài)下，PCR -
第三代分子標記SNP在不同領(lǐng)域的應用基因檢測的目的是鑒定在基因組上對疾病或復雜性狀起作用的特殊因子，這種因子通常屬于堿基水平的變異，同時能穩(wěn)定遺傳給下一代，久而久之成為了不同人群的“遺傳標志物”。在基因組學中，這種標志物被稱為“DNA分子標記”，它們在人類基因組中數(shù)量頻密且功能特異。SNP作為第三代分子標記，被廣泛應用于疾病診斷和治療、法醫(yī)物證檢驗以及動植物育種等眾多領(lǐng)域。上一篇文章（不同SNP檢測技術(shù)的原理—ARMS、KASP、TaqMan、分子信標及HRM）我們介紹了SNP分型檢測的幾種常用
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精品推薦 | 僅需5min！高效完成反轉(zhuǎn)錄實驗
精品推薦|僅需5min！高效完成反轉(zhuǎn)錄實驗Hifair®AdvanceFast1stStrandcDNASynthesisKit是基于Hifair®III1stStrandcDNASynthesisKit開發(fā)的快速逆轉(zhuǎn)錄試劑盒，適用于PCR擴增以及RT-qPCR實驗。與Hifair®III1stStrandcDNASynthesisKit相比，具有穩(wěn)定的檢出率、特異性、產(chǎn)量保證，且反轉(zhuǎn)錄總時長最快可低于6分鐘，大大縮短了實驗時間。產(chǎn)品名稱Hifair®AdvanceFast1stStrandcD -
翌圣全能型逆轉(zhuǎn)錄酶重磅上市！逆轉(zhuǎn)錄酶是逆轉(zhuǎn)錄的核心酶原料，被廣泛應用于RT-PCR/qPCR、RNA-seq、單細胞測序等場景，但不同應用場景對逆轉(zhuǎn)錄酶有不同的性能要求，如RT-qPCR，需要逆轉(zhuǎn)錄酶具有高靈敏度、高cDNA產(chǎn)量、可兼容復雜結(jié)構(gòu)模板等；在主流單細胞測序技術(shù)中，還需要具有末端轉(zhuǎn)移酶活性；用于cDNA克隆則需要可以合成全長的cDNA。目前市售的逆轉(zhuǎn)錄酶很難實現(xiàn)一酶兼具多種應用場景，不同的應用場景往往需要篩選不同的逆轉(zhuǎn)錄酶。為實現(xiàn)一個逆轉(zhuǎn)錄酶可兼具多個應用，翌圣ZymeEditor™酶
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CUT&Tag技術(shù)，作為研究蛋白質(zhì)-DNA互作的新興技術(shù)，從問世之初，就一直備受關(guān)注。Nanobody（納米抗體）在藥物抗體研究中的風很大，在醫(yī)藥領(lǐng)域備受青睞。那納米抗體怎么就與CUT&Tag關(guān)聯(lián)上了呢？2022年12月，Gon?aloCastelo-Branco課題組和美國紐約基因組中心IvanRaimondi團隊同期在NatureBiotechnology上發(fā)表了關(guān)于nanobody-Tn5的文章。Nanobody-Tn5主要是將納米抗體與Tn5轉(zhuǎn)座酶進行融合，制備出可結(jié)合兩種不同物種（小鼠
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不同SNP檢測技術(shù)的原理——ARMS、KASP、TaqMan、分子信標及HRM
不同SNP檢測技術(shù)的原理——ARMS、KASP、TaqMan、分子信標及HRM單核苷酸多態(tài)性（SingleNucleotidePolymorphisms，SNP）主要是指在基因組水平上由單個核苷酸的變異所引起的DNA序列多態(tài)性，是人類可遺傳變異中最常見的一種，占所有已知多態(tài)性的90%以上。當SNP發(fā)生在基因編碼區(qū)或基因的調(diào)節(jié)區(qū)域時，它會對基因表達產(chǎn)生巨大的影響，從而影響基因的功能，例如鐮狀細胞貧血、β地中海貧血等單基因遺傳病的發(fā)生主要是由于SNP的出現(xiàn)。同時，研究人員發(fā)現(xiàn)，SNP可能有助于預測個 -
雜交捕獲家族“核心成員”大揭秘！近年來，高通量測序技術(shù)發(fā)展迅速，測序成本也在逐漸降低。但就現(xiàn)階段而言，全基因組測序的成本依然很高，且測序之后得到的龐大數(shù)據(jù)量也導致數(shù)據(jù)分析速度緩慢。與全基因組測序相比，靶向捕獲測序可以針對感興趣的區(qū)域進行富集，單個樣本所需測序數(shù)據(jù)量顯著降低且分析速度更快。不僅如此，靶向測序還可以對目標區(qū)域進行深度測序，在遺傳突變檢測、腫瘤篩查等領(lǐng)域，相同測序成本下靶向捕獲測序能達到更高的靈敏度。圖1.3種測序方法簡單對比靶向捕獲包含雜交捕獲、多重PCR和分子倒置探針捕獲。和PCR
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翌圣&華大共發(fā)布中華家系一號全自動化轉(zhuǎn)錄組測序數(shù)據(jù)
翌圣&華大共發(fā)布中華家系一號全自動化轉(zhuǎn)錄組測序數(shù)據(jù)自動化建庫當前，高通量測序已成為生命科學領(lǐng)域最有力的工具，極大促進了腫瘤、遺傳病和病原等領(lǐng)域的發(fā)展。高通量測序中的建庫操作仍存在流程繁瑣、人力資源依賴程度高、自動化程度低等問題，限制了其在臨床轉(zhuǎn)化上的應用。為促進生產(chǎn)轉(zhuǎn)型和臨床應用，高效穩(wěn)定的自動化建庫方案是必由之路。轉(zhuǎn)錄組測序轉(zhuǎn)錄組測序（transcriptomesequencing）已經(jīng)成為轉(zhuǎn)錄組研究的主要方法，可以全面快速地獲得某一物種特定組織或器官在某一狀態(tài)下的幾乎所有轉(zhuǎn)錄本序列信息，進而
