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磷酸鈣轉染試劑是一種經典的基因轉染工具,它通過形成DNA-磷酸鈣共沉淀物,促進細胞通過內吞作用吸收DNA,適用于多種真核細胞的瞬時和穩定轉染,以其操作簡便、成本低廉、轉染效率高而廣受歡迎。基本原理0101DNA與磷酸鈣的結合在含有磷酸鹽的緩沖液(HBS)中,加入氯化鈣(CaCl2)溶液和含有目的DNA的溶液。DNA分子在生理pH條件下帶負電荷,而磷酸鈣帶正電荷,通過靜電作用,DNA與磷酸鈣結合。02形成DNA-磷酸鈣共沉淀物當DNA與磷酸鈣混合后,會形成DNA-磷酸鈣共沉淀物。這些沉淀物是微小的
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之前小翌給大家分享了如何設計qPCR引物這個實用干貨(過癮!一文搞懂qPCR引物設計,實驗達人技能!),不少小伙伴覺得挺過癮的。但是仍有不少小伙伴表示,自己設計的引物還要做實驗再驗證,要是設計的引物出現問題,又得重新設計等一段時間才能開展自己的實驗,有沒有可以直接用的引物序列呢?畢竟物種的基因組正常情況下不會發生太大變化。哈哈哈,又來給小翌上強度了,小翌今天針對小伙伴們的需求,給大家上干貨!這一篇給大伙兒介紹如何站在巨人的肩膀上更高效地獲得一些qPCR引物序列~其實在之前的干貨中,有提到一個數據
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核酸電泳是分子生物學研究中的一項基本技術,廣泛應用于基因克隆、DNA指紋分析、RNA表達研究等領域。這項技術的核心在于利用電場驅動DNA或RNA分子通過凝膠基質,實現不同大小分子的分離。盡管核酸電泳的原理相對簡單,但其往往影響最終的成果展示。所以在實際操作過程中,如何提高電泳效率、獲得更清晰的條帶一直是研究人員追求的目標。小翌將分享一些實用的實驗室小竅門,以幫助各位科研小伙伴們提高電泳效率~電泳槽小竅門1選擇合適的凝膠濃度和電泳緩沖液凝膠濃度對電泳分離效率有著直接影響。瓊脂糖是常用的凝膠材料,其
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微生物群落多樣主要包括物種多樣性、遺傳多樣性和功能多樣性3個方面,在環境、能源、食品與人體健康等諸多領域有著廣泛的研究與應用。16SrRNA擴增子測序技術是微生物群落多樣性檢測常用的組學技術之一,該技術無需對微生物分離培養,直接提取樣本里面所有微生物的基因組,利用合適的通用引物擴增16SrDNA/18SrDNA/ITS等高變區或功能基因,采用高通量測序儀Miseq、Hiseq或Novaseq對其進行測序,通過生物信息學分析可以獲得特定實驗樣品中細菌、真菌或古菌等的物種組成、物種豐度、系統進化、群
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背景介紹疫苗是將病原微生物(如細菌、病毒等)及其代謝產物,經過人工減毒、滅活或利用基因工程等方法制成的用于預防傳染病的自動免疫制劑。自1798年英國醫生琴納研發牛痘疫苗以來,疫苗作為預防性藥物,在患病之前給予人體抵御疾病的能力,比治療性藥物意義更加重大。早期疫苗大多預防的是嚴重的、流行度高的傳染性疾病,例如牛痘疫苗預防的天花曾經在1900-1908年間在全球殺死5億人,十四世紀的鼠疫曾經導致歐洲三分之一的人口死亡。疫苗的出現,終結了這種毀滅性的災難,將人類從生存威脅中解放出來,功不可沒。根據St
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細胞培養作為現代生命科學研究的重要手段之一,為我們深入探索生命的奧秘提供了有力的工具。通過在體外模擬體內環境,讓細胞在適宜的條件下生長、增殖和分化,可以研究細胞的生理功能、疾病發生機制以及開發新的治療方法。然而,要實現高質量的細胞培養并非易事,培養基的選擇至關重要。含血清培養基在傳統的細胞培養中,含血清培養基被廣泛使用。血清中含有豐富的營養成分和生長因子,能夠支持細胞的生長和增殖。然而,血清培養也存在諸多缺點。01血清的成分復雜且不明確,不同批次之間存在差異;02血清可能攜帶病毒、支原體等潛在污
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干細胞(Stemcells)是未分化的或部分分化的細胞,具有自我更新和多次分化的能力。在一定條件下,可分化成多種功能細胞。未充分分化的干細胞因具有再生各類組織器官和人體的潛在功能,被稱為“萬用細胞”。常見干細胞培養有造血干細胞(HSC),胚胎干細胞(ESC),神經干細胞(NSC),多功能干細胞(iPSC),間充質干細胞(MSC)等干細胞培養。由于干細胞具有再生組織和修復的潛力,來替換身體里受損或生病的細胞,因此在自身免疫性疾病、神經系統性疾病、心血管類疾病、骨骼系統疾病、眼科類疾病以及代謝性類疾
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01無處不在的RNase污染RNase(Ribonuclease,核糖核酸酶)是一類能夠催化RNA降解為小分子RNA的核酸內切酶,主要切斷核苷酸之間的磷酸二酯鍵,是生物的一種防御機制,相比于外源性的DNA,外源性的RNA侵入細胞后會參與轉錄和翻譯,往往更加危險。所以幾乎所有的生物都進化出了RNase,用來防御外源性RNA的入侵。因此,RNase廣泛存在于真核、原核生物的所有細胞和組織中,除此之外,環境和許多生物材料都帶有RNase,像實驗用水與緩沖液、槍頭與離心管、酶及其他相關試劑和耗材等;實驗