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熒光分光光度計(jì)的熒光分光光度法試驗(yàn)
熒光分光光度計(jì)是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。可用于液體、固體樣品(如凝膠條)的光譜掃描。
所用的儀器為熒光計(jì)或熒光分光光度計(jì)，按各品種項(xiàng)下的規(guī)定，選定激發(fā)光波長(zhǎng)和發(fā)射光波長(zhǎng)，并制備對(duì)照品溶液和供試品溶液。
通常熒光分光光度法是在一定條件下，測(cè)定對(duì)照品溶液熒光強(qiáng)度與其濃度的線(xiàn)性關(guān)系。當(dāng)線(xiàn)性關(guān)系良好時(shí)，可在每次測(cè)定前，用一定濃度的對(duì)照品溶液校正儀器的靈敏度；然后在相同的條件下，分別讀取對(duì)照品溶液及其試劑空白的熒光強(qiáng)度與供試品溶液及其試劑空白的熒光強(qiáng)度，計(jì)算供試品濃度。
當(dāng)濃度與熒光強(qiáng)度明顯偏離線(xiàn)性時(shí)，應(yīng)改用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法進(jìn)行含量測(cè)定。
對(duì)易被光分解或弛豫時(shí)間較長(zhǎng)的品種，為使儀器靈敏度定標(biāo)準(zhǔn)確，避免因激發(fā)光多次照射而影響熒光強(qiáng)度，可選擇一種激發(fā)光和發(fā)射光波長(zhǎng)與供試品近似而對(duì)光穩(wěn)定的物質(zhì)配成適當(dāng)濃度的溶液，作為基準(zhǔn)溶液。在測(cè)定供試品溶液時(shí)選擇適當(dāng)?shù)幕鶞?zhǔn)溶液代替對(duì)照品溶液校正儀器的靈敏度。
熒光分光光度計(jì)應(yīng)用
對(duì)經(jīng)光源激發(fā)后產(chǎn)生熒光的物質(zhì)或經(jīng)化學(xué)處理后產(chǎn)生熒光的物質(zhì)成份分析，可應(yīng)用于生物化學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境化工等部門(mén)。