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上海棱光技術有限公司

分光光度計的顯色反應

時間:2019-1-31 閱讀:1833
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  分光光度計采用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源,光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。
 
  分光光度計的顯色反應一般要求影響顯色反應因素選擇性好、靈敏度高,生成的有色化合物性質穩定,顯色劑與有色物顏色反差大,顯色反應要易于控制顯色劑用量、反應液的酸堿度(pH)、反應溫度、顯色反應時間干擾離子的影響。
 
  1、顯色反應一般要求
 
  (1)選擇性好:顯色劑只與一種被測組分起顯色反應;
 
  (2)靈敏度高:靈敏度高有笪微量組分的測定;
 
  (3)有色化合物性質穩定:確保前后測定準確.
 
  (4)顯色劑與有色物顏色反差大:兩者zui大吸收波長之差應大于60nm;
 
  (5)顯色反應要易于控制:結果的確保實驗再現性.
 
  2、影響顯色反應的主要因素
 
  (1)顯色劑用量:通過實驗來確定zui適用量;
 
  (2)反應液的酸堿度(pH):溶液酸堿度直接影響金屬離子與顯色劑存在形式以及有色化合物組成的穩定性.
 
  (3)反應溫度:不同的顯色反應需要不同的反應溫度,一般顯色反應可在室溫下完成.
 
  (4)顯色反應時間:顯色反應的速度有快有慢.
 
  (5)干擾離子的影響:應采用適當方法消除其影響.
 
  實驗室分光光度計是利用分光光度法,通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度,對該物質進行定性和定量分析。
 
  不同種類的分光光度計的基本原理相似,都是利用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源。光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,通過測量樣品的吸光值,經過計算可以轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
 
  分光光度計采用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源,光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
 

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