土壤無機(jī)磷（S-PHOS）含量測定試劑盒說明書

微量法 100T/96S

土壤無機(jī)磷S-PHOS含量測定試劑盒

正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義：

磷是植物必需大量元素。植物主要通過根系從土壤中獲取磷元素。土壤磷包括有機(jī)磷和無機(jī)磷。土壤有機(jī)磷經(jīng)過礦化分解而轉(zhuǎn)化為無機(jī)磷，才能進(jìn)一步被植物吸收利用。

測定原理：

從土壤中提取無機(jī)磷，在酸性環(huán)境中，通過鉬藍(lán)法定磷，即可計(jì)算出無機(jī)磷含量。

試劑組成和配制：

試劑三：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前配制，加入 8ml 蒸餾水，充分溶解后加入 4ml 試劑二，混勻。

標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1 支，20μmol/L 無機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)液，4℃保存。

自備儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式水浴鍋，分析天平、可調(diào)式移液器、蒸餾水和 100 目篩子。

土壤無機(jī)磷提取：

取 10ml 離心管，加入精確稱取的 100 目篩子過篩的風(fēng)干土樣約 0.01g，加入 1ml 提取液，震蕩混勻，然后置于 40℃水浴浸提 1h，8000g，25℃，離心 10min，取上清液，待測。

測定步驟：

分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min 以上，調(diào)節(jié)波長到 660 nm，蒸餾水調(diào)零。

打開水浴鍋，調(diào)節(jié)溫度到 40℃。

空白管：取EP 管，依次加入 100μl 蒸餾水，100μl 試劑三，混勻后置于 40℃水浴保溫10min，室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度，記為A 空白管。

標(biāo)準(zhǔn)管：取EP 管，依次加入 10μl 標(biāo)準(zhǔn)液，90μl 蒸餾水，100μl 試劑三，混勻后置于 40℃水浴保溫10min，室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度，記為A 標(biāo)準(zhǔn)管。

測定管：取EP 管，依次加入 10μl 上清液，90μl 蒸餾水，100μl 試劑三，混勻后置于 40℃水浴保溫10min，室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度，記為A 測定管。需在 40min 內(nèi)完成比色。

土壤無機(jī)磷含量計(jì)算公式：

使用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下

S-PHOS（μmol /g 干重）=[C 標(biāo)準(zhǔn)液×(A 測定－A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)－A 空白)]×V 總÷W=0.02×(A 測定－A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)－A 空白)÷W

C 標(biāo)準(zhǔn)液：20 μmol/L；V 總：總上清液體積，1 ml=0.001 L；W：土壤樣品質(zhì)量，g。

使用 96 孔板測定的計(jì)算公式如下

S-PHOS（μmol /g 干重）=[C 標(biāo)準(zhǔn)液×(A 測定－A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)－A 空白)]×V 總÷W =0.02×(A 測定－A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)－A 空白)÷W

C 標(biāo)準(zhǔn)液：20 μmol/L；V 總：總上清液體積，1 ml=0.001 L；W：土壤樣品質(zhì)量，g。

注意事項(xiàng)：

1、空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。

2、試劑三需臨用前配制，限當(dāng)天使用。試劑三配制過程中，可能會(huì)產(chǎn)生黑色固體，其不影響結(jié)果，注意吸取時(shí)不要將黑色固體吸入。

3、40min 內(nèi)完成比色。

土壤無機(jī)磷S-PHOS含量測定試劑盒