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犬狂犬病毒IgG抗體(RVA-IgG)ELISA試劑盒提供免費檢測服務，公司將根據實驗工作量和難易程度，雙方協定實驗周期，保質保量完成委任實驗，只收取試劑盒的費用，其他輔助試劑全部免費。產品質量，服務質量雙重保障，您盡可放心購買、訂購！

檢測原理：試劑盒采用一步間接法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被狂犬病毒抗原的包被微孔中，依次加入標本、HRP標記的檢測抗抗體，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），與CUTOFF值相比較，從而判定標本中犬狂犬病毒IgG抗體的存在與否。

試劑盒組成及其配置如下：

犬狂犬病毒IgG抗體(RVA-IgG)ELISA試劑盒操作步驟：

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設置陰、陽性對照孔和樣本孔，陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各50μL；

3.  待測樣本孔先加待測樣本10μL，再加稀釋液40μL；

4.  隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗原100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。

ELISA實驗中一般需要4次加樣，即加標本、加檢測抗體、加底物和加終止液。實驗室使用的微量加樣器應注意保樣并定期校正。ELISA比較敏感，每孔加入液體量誤差會導致最后讀書差別，因此避免儀器帶來誤差。加樣注意事項：

加樣前：溶液應充分混勻。加樣時避免90度向孔中滴加液體，否則會導致液體殘留再吸頭上，從而導致加樣不準確。正確的加樣方法應為45度，吸頭貼著孔壁和液面的交界處加入。

加樣時：避免速度過快，否則無法保證微量加樣的準確性和均一性；避免液體濺出；

加樣品時：單孔用量要求：≥50微升/指標，如需要做2個復孔則血量≥100微升/指標。

每次加樣順序一致，尤其底物、終止液順序一致，保證每個孔顯色時間相同。

如果移液槍漏氣以至于加樣的量不夠，不能用槍吸出再加，做相應記錄實驗。