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植物硝酸鹽轉運蛋白（NOT）ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法：

1.  樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因為疊氮鈉（NaN3）是辣根過氧化物酶（HRP）的抑制劑。

2.  標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行。

3.  植物萃取液或其它相關樣本：請1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測。

（植物處理方案）

1、 新鮮植物組織請在液氮中充分研磨，如無液氮，剪碎，玻璃勻漿器研磨也可；

2、 加入樣品體積9倍（鮮重：勻漿液體積）的提取液（0.1mmol PH7.4 PBS ）, 4℃浸提2h；

3、 請于4℃ ，3000rpm，離心10min，收集上清；

4、 取上清檢測。

注：標本均應密封保存，短期內使用（1周左右），可4度保存；若樣本收集與實驗時間相隔較長，務必保存在-20或-80度，盡量不要超過半年，同時避免反復凍融。

植物硝酸鹽轉運蛋白（NOT）ELISA檢測試劑盒組成及其配置：

1. 96孔酶聯板(Assay plate ):可檢測90個樣

2. 20x濃縮洗滌液(20X WashSolution): 25ml

3. 標準品(Standard):0.3ml*6管

4. 稀釋液(Sample Diluent): 6ml

5. 終止液(Stop Solution): 6ml

6. 底物溶液A、B（Chromogen Solution）:6ml*

7. 檢測抗體-HRP（HRP-Conjugate reagent）:10ml

8.說明書（User manual）

9.封板膜（Closure plate membrane）

10.自封袋（Sealed bags）

ELISA試劑盒的使用過程中常見的問題有很多。如：加樣器不正 確、保溫設備不良、洗滌用水不規范等等對檢測結果影響極大。我司為您準備了以下解決問題的方法：

1）嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果，所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃，使用后立即冷藏保存試劑。

2）洗板不正確可以導致不準確的結果，在加入底物前確保盡量吸干孔內液體，溫育過程中不要讓微孔干燥。

3）消除底板殘留的液體和手指印，否則影響OD值。

4）底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經變藍的底物液不能使用。

5）避免試劑盒標本的交叉污染以免造成錯誤結果。

6）任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體，避免影響試劑中的生物活性。

7）平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。