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實時熒光定量PCR注意事項

時間:2022/9/21閱讀:1480
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  1.按照正確的開關(guān)機(jī)順序操作,有助于延長儀器的使用壽命,減少儀器出故障的頻率.開機(jī)順序:先開電腦,待電腦*啟動后再開啟定量PCR儀主機(jī),等主機(jī)面板上的綠燈亮后即可打開定量PCR的收集軟件,進(jìn)行實驗.關(guān)機(jī)順序:確認(rèn)實驗已經(jīng)結(jié)束后,首先關(guān)閉信號收集軟件,然后關(guān)掉定量PCR儀主機(jī)的電源,關(guān)閉電腦.
  2.應(yīng)該定期備份您的實驗數(shù)據(jù),備份頻率推薦每周一次,用光盤刻錄.同時您也應(yīng)該備份定量PCR儀的各種純熒光光譜校正文件、背景文件和安裝驗證實驗數(shù)據(jù),這些文件所在的目錄是C:/Appliedbiosystems/SDSDocument.
  3.良好的實驗室環(huán)境有助于延長儀器的使用壽命,減少儀器出故障的頻率.推薦做到以下幾個方面:
  電源:推薦配備合適的UPS或穩(wěn)壓器.
  通風(fēng):儀器的通風(fēng)應(yīng)該沒有阻擋.
  溫度:推薦實驗室配備空調(diào),溫度應(yīng)該控制在10-30°C之間.
  濕度:20-80%;對于潮濕的省份,推薦實驗室配備除濕機(jī).
  空間:易于操作,安全.
  4.怎樣判斷定量PCR儀的樣本加熱塊是否被污染?怎樣清除污染
  一個辦法是運(yùn)行背景校正反應(yīng)板,當(dāng)一個或多個反應(yīng)孔連續(xù)顯示出不正常的高信號,則表明該孔可能被熒光污染物.另外一種辦法是在不放任何物品到樣本塊上的前提下,執(zhí)行ROI的校正,當(dāng)某個孔的信號明顯高出其他孔時,則表明該孔被污染.
  清除樣本加熱塊污染的步驟如下:用移液器吸取少量乙醇并滴入每個污染的反應(yīng)孔中.吹打數(shù)次.將廢液吸入廢液杯中.重復(fù)以上步驟:乙醇三次,去離子水三次.確認(rèn)反應(yīng)孔中的殘留液體蒸發(fā)完.

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