今天為大家?guī)砑?xì)胞培養(yǎng)常遇問題的第十期，看看本期都為大家分享常遇的都有哪類型的問題，小編已為各位客官整理出來了~~來，上正片！

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▲問：昨天剛剛復(fù)蘇的細(xì)胞，今天出現(xiàn)這個(gè)情況，會(huì)是什么問題呢？那是不是因?yàn)閮龃娴臅r(shí)候就污染了呢？

答：一片兒一片兒的，黑云彩一樣的，是霉菌污染。也有可能。

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▲問：培養(yǎng)液是清亮的，高背景下看細(xì)胞也沒有異常，請問這是霉菌嗎？

答：這個(gè)東西很常見，有可能是血清蛋白沉淀或培養(yǎng)耗材里的雜質(zhì)。

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▲問：以上三圖霉菌污染怎么處理么呢？三抗一直在用沒有效果。而且會(huì)長的越來越多。代數(shù)低的是這樣。少數(shù)有，大多數(shù)沒有。

答：這個(gè)細(xì)胞看起來老化得很嚴(yán)重呀。共用培養(yǎng)箱的其他人有這種污染嗎？可能環(huán)境有污染，沒得到*。

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▲問：上面三個(gè)圖，三陰性乳腺癌細(xì)胞，細(xì)胞中間這些空泡是怎么回事呀，是細(xì)胞狀態(tài)不好嘛？

答：細(xì)胞狀態(tài)看著還可以，空泡有可能是雜細(xì)胞或者細(xì)胞凋亡形成的。

問：雜細(xì)胞為啥不是正常細(xì)胞（摻入的細(xì)胞）的形態(tài)呀？

答：如果是MSC，間沖干里面的亮點(diǎn)細(xì)胞是分裂能力強(qiáng)的細(xì)胞，不是分化，分化不會(huì)發(fā)亮。也有可能雜細(xì)胞或者未貼壁細(xì)胞。

問：就養(yǎng)兩種細(xì)胞，另一種用的同種培養(yǎng)基。

答：還有一種可能，就是細(xì)胞有老化，老化的細(xì)胞形態(tài)會(huì)發(fā)生改變。這個(gè)細(xì)胞狀態(tài)沒問題，不用擔(dān)心。分辨是不是老化比較簡單，傳代的時(shí)候一瓶密度稍大一些，另一瓶密度稍微小一些，如果是老化，密度小的那瓶異形態(tài)細(xì)胞會(huì)比較多。如果細(xì)胞有老化現(xiàn)象，傳代的時(shí)候注意密度要稍微大一些。中間空泡可能是凋亡細(xì)胞。

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問：臍帶MSC原代培養(yǎng)有什么技巧啊？之前分離全被污染了。

答：可用MSC無血清培養(yǎng)基消化法。

問：之前用的是貼壁法呢？

答：也可參考MSC無血清培養(yǎng)基組織塊法操作。

問：整個(gè)培養(yǎng)皿都黏糊糊的，鏡下看都是污染了，沒看到細(xì)胞。

答：原代加慶大霉素預(yù)防得好些。

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