人氣管上皮細胞的用途和分離培養方法

　　上皮細胞覆蓋于身體表面并襯貼于體內空腔器官腔面的細胞。其排列有明顯極性，一面朝向身體表面或腔面，稱游離面；一面向著深部的結締組織，稱基底面。上皮細胞具有強大的角生和更新能力。上皮組織具有保護、吸收、分泌和排泄等作用。當上皮細胞受損時，則影響機體的防御功能。

　　人氣管上皮細胞分離自氣管組Chemicalbook織；氣管上皮是氣道與外界環境接觸的第一道防線，不僅是各種病原體、炎癥介質作用的靶細胞，還作為效應細胞合成、釋放多種炎性介質和細胞因子從而參與氣道炎癥及免疫反應。體外培養的原代人氣管上皮細胞因與體內組織在形態結構和功能活動上存在很大的相似性，因此，在基礎及臨床研究中極為重要。

　　人氣管上皮細胞分離培養：

　　獲取的氣管組織需保存于低溫PBS溶液中，消化分離前使用無菌PBS沖洗，去除多余的連接組織和淋巴結等，盡量只留氣管內部表面組織。用手術刀將組織切成1cm×2cm的碎片，置于PBS（含1mg／ml蛋白酶XⅣ）中，4℃消化12～24h，10％FBS終止消化后，振搖分離上皮細胞，600×g離心5min。加入Chemicalbook配制好的BEGM（含100IU／ml青霉素，100IU／ml鏈霉素）培養液重懸細胞，轉移入培養皿中，37℃孵育1h。采用差速貼壁法除去先貼壁的成纖維細胞后，再收集上皮細胞，調整密度后接種于Ⅰ／Ⅲ膠原包被的培養皿中，于37℃，5%CO2條件下培養。細胞貼壁后，每隔1d更換1次培養基，同時觀察記錄細胞的生長狀態。