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實時熒光定量PCR是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料，利用熒光信號積累對PCR反應的過程，進行實時監(jiān)控實現(xiàn)起始模板的準確定量。實時熒光定量PCR標準品梯度稀釋方法依次是選擇目標、提取/PCR、純化、測試濃度、調整濃度、梯度稀釋。一般CT值在18-30之間，覆蓋全部樣品濃度區(qū)間。和大家在分享一下10倍連續(xù)梯度稀釋方法：1V原液（標準品為i）+9V稀釋緩沖液，得到標準品為ii。1V標準品ii+9V稀釋緩沖液，得到標準品為iii, 1V標準品iii+9V稀釋緩沖液，得到標準品為iv, 1V標準品iv+9V稀釋緩沖液v,切不可用標準品i分別加不同體積的稀釋緩沖液直接得到標準品ii、iii、iv、v，標準品要復管做測試，復管次數(shù)要遵循統(tǒng)計學要求。熒光PCR凍干時，制品溶液厚度不宜過厚。一般應為10-15mm，制品過厚的情形類似于濃度過高時的情況，不僅干燥的時間更長，塌陷、結塊。凍干機Pilot3-6T醫(yī)療應用涉及產品有：熒光PCR、免疫微球、化學發(fā)光、基因芯片、量子點、ELISA、膠體金、POCT、IVD校準品質控品校準品、內毒素檢測試劑、血清、白蛋白、干細胞及相應提取物等。

型號	Pilot3-6T	Pilot5-8T	Pilot7-12T	Pilot10-15T
凍干面積	0.42㎡	0.56㎡	0.84㎡	1.05㎡
∅22西林瓶裝量（20ML）	≥900支	≥1170支	≥1500支	≥2100支
∅16西林瓶裝量（5ML）	≥1700支	≥2210支	≥3100支	≥4100支
冷阱溫度（空載）	-85℃
真空度（空載）	≤1Pa
板層溫度（空載）	-55℃
板層制冷方式	硅油循環(huán)
板層數(shù)量	3+1	4+1	4+1	5+1
板層尺寸（mm）	350*400	350*400	350*600	350*600
捕水能力	6L	8L	12L	10L
凍干效率	3L/24H	5L/24H	7L/24H	10L/24H
板層間距	100mm	80mm	90mm	100mm
穿墻隔離	√	√	√	√
凍干曲線擬合度	100%	100%	100%	100%
晶型控制	√	√	√	√
蒸汽分壓控制	√	√	√	√
升華結束判定	√	√	√	√
凍干終點測試	√	√	√	√
壓塞	液壓
整機尺寸 （約）	W860*D1400*H1800	W860*D1400*H1800	W860*D1700*H1900	W860*D1700*H1900