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實驗原理
軟骨組織由軟骨細胞和軟骨基質組成,軟骨組織及其周圍的軟骨膜構成軟骨。軟骨根據基質內所含纖維素成分不同分為透明軟骨、彈性軟骨、纖維軟骨。軟骨染色方法有很多種,例如甲苯胺藍法、阿利新藍法、番紅0法等。番紅0-固綠軟骨染色法的染色原理在于嗜堿性的軟骨與堿性染料番紅O結合呈現紅色,嗜酸性的骨和酸性染料固綠結合而呈綠色或藍色,與呈現紅色的軟骨對比鮮明,從而將軟骨組織與骨組織區分開。通過圖像分析軟件可對番紅0染色的軟骨基質進行定量分析。
染色步驟
(1 )骨組織固定、脫鈣,制成石蠟切片;
(2)切片常規脫蠟至水;
(3)入新鮮配制的Weigert染液染色;
(4)流水沖洗;
(4 )酸性乙醇分化液分化;
(5)蒸餾水洗;
(6)在固綠染色液內浸染;
(7)蒸餾水洗;
(7)入番紅O染液內浸染;
(8)蒸餾水洗;
(9 )用乙酸溶液洗滌切片,以便去除殘留的固綠,再用蒸餾水洗;
( 10)分別用95%乙醇、無水Z醇脫水;
(11)二甲苯透明,中性樹脂封固;
(12)鏡檢。