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免疫組化實驗服務的原理與意義：

免疫學基本原理通過標記的特異性抗體(或抗原)對組織內抗原(或抗體)的分別進行組織和細胞原位檢測，從而進行定位、定性及相對定量的研究。

實驗意義：

1.免疫組織化學可應用于惡性腫瘤的病理診斷和科研工作。2.可與組織化學染色方法的形態學診斷相結合，提高疑難腫瘤的鑒別診斷的準確率并為腫瘤進行進一步的病理分型。 3.指導和提供臨床治療方案的選擇。
免疫組化實驗服務的實驗步驟：

1.石蠟切片免疫組化:

①67°C烘箱烘片2小時,常規脫蠟至水用pH 7.4的PBS沖洗三次。每次3 min ;

②將切片置于沸騰的檸檬酸鹽緩沖液中中檔微波處理10 min蒸餾水沖洗三次。PBS沖洗三次，每次3 min;

③3%H202室溫孵育10 min阻斷內源性過氧化物酶的活性, PBS)沖洗三次,每次3 min ;

④5~10%正常山羊血清(PBS稀釋)封閉.室溫孵育10 min ,吸去血清后滴加稀釋至適當比例的一抗。 37*C孵育1-2 h或者4°C孵育過夜;

⑤PBS沖洗三次每次3 min ;滴加稀釋至適當比例的帶標記:二抗379C孵育10~30 min ,PBS沖洗三次，每次3 min ;

⑥滴加適當比例稀釋的辣根酶標記物工作液379C孵育10-30 min, PBS)沖洗三次。每次3 min;

⑦顯色劑顯色自來水充分沖洗,復染細胞核酒精脫水二甲苯透明、中性樹膠封固。

2冰凍切片免疫組化:

①新鮮組織立即在恒冷冰凍切片機內切片厚度為5~6 um ;

②載玻片可不打底裱片后立刻用電吹風吹干;

③染色前需用冷*酮4°c固定10-20 min:

④PBS洗2次,每次5 min;.

⑤3%H202滅活內源性過氧化物酶20 min ,需遍光處理;

⑥后續血清封閉與抗體孵育步驟與石蠟切片相似后脫水透明封片進行觀察。