實驗流程?

1. ?樣本前處理?

• ?固定?：組織需用10%中性福爾馬林或4%多聚甲醛固定24小時以上
  。

• ?脫水包埋?：常規(guī)梯度酒精脫水、透明后石蠟包埋，切片厚度建議5μm
  。

2. ?脫蠟至水?

• 依次浸泡：二甲苯Ⅰ 20min → 二甲苯Ⅱ 20min → 無水乙醇Ⅰ 5min → 無水乙醇Ⅱ 5min → 75%酒精5min → 蒸餾水沖洗3遍
  。

3. ?普魯士藍染色?

• ?染液配制?：等體積混合2%K?[Fe(CN)?與2%鹽酸溶液
  。

• ?染色時間?：切片浸入染液30分鐘至1小時（根據(jù)組織類型調整）
  。

• ?沖洗?：蒸餾水洗2遍終止反應
  。

4. ?復染與封片?

• ?核固紅復染?：1-5分鐘染細胞核，流水沖洗
  。

• ?脫水透明?：無水乙醇脫水（兩缸各5分鐘）→ 二甲苯透明（兩缸各5分鐘）→ 中性樹膠封片。

?染色結果?

• ?陽性信號?：三價鐵沉積呈藍色顆粒（如含鐵血黃素）
  。

• ?細胞核?：核固紅復染后呈紅色
  。

?關鍵注意事項?

• ?染液新鮮度?：K?[Fe(CN)?與鹽酸需現(xiàn)配現(xiàn)用，避免失效
  。

• ?分化控制?：顯微鏡下觀察藍色信號，避免過度沖洗導致脫色
  。

• ?封片技巧?：二甲苯未干時快速封片，防止高倍鏡下出現(xiàn)結晶偽影6。

?應用示例?

• ?病理診斷?：檢測肝臟、骨髓中的鐵代謝異常
  。

• ?外包服務?：可聯(lián)系伊萊博生物科技等專業(yè)機構

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