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技術文章

環丙沙星檢測試劑盒樣本前處理具體操作步驟

閱讀:1543          發布時間:2019-11-11

環丙沙星檢測試劑盒樣本前處理具體操作步驟

5 樣本前處理

5.1 樣本處理前須知:

實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實驗結果。

5.2 配液:

配液1:0.15M鹽酸溶液

    取5ml濃鹽酸,加入去離子水中定容到400ml。

配液2:樣本提取液

    量取10ml 0.15M鹽酸溶液(配液1)加入到90ml無水乙腈中混合均勻。

配液3:復溶液

    將5×復溶液用去離子水5倍稀釋,用于樣本的復溶,復溶液在4℃環境可保存一個月。

5.3 樣本前處理步驟:

5.3.1 動物組織(雞肉、豬肉、魚、蝦)處理方法

1)稱2.0±0.05g 均質過的組織樣本于50ml離心管中;

2)加入8ml樣本提取液(配液2),振蕩5分鐘,室溫4000轉/分離心10分鐘;

3)取2ml清澈上層有機相至潔凈干燥的10ml玻璃試管中,50-60℃水浴氮氣吹干;

4)加入1ml正己烷,振蕩2分鐘,再加1ml復溶液(配液3),振蕩30秒,室溫4000轉/分離心5分鐘;

5)去除上層正己烷,取下層水相50µl液體用于分析。

樣本稀釋倍數:2    檢測下限:0.3ppb

5.3.2 蜂蜜處理方法

1)取1.0±0.05g蜂蜜至50ml聚苯乙烯離心管中,加6ml樣本提取液(配液2),振蕩5分鐘,使其充分溶解;

2)加入3ml復溶液(配液3),加入11ml二氯甲烷,振蕩5分鐘,室溫4000轉/分,離心5分鐘;

3)吸去上層,取下層有機相8ml至干燥溶器中,50-60℃水浴氮氣吹干;

4)用1ml復溶液溶解干燥的殘留物,再加入正己烷1ml混合30秒,室溫3000轉/分以上,離心5分鐘;

5)去除上層取下層50µl液體用于分析。

樣本稀釋倍數:2    檢測下限:0.4ppb

5.3.3 牛奶處理方法:

1)取25µl樣本液與475µl復溶液(配液3)混合,振蕩1分鐘,使其充分溶解;

2)取50µl液體用于分析。

樣本稀釋倍數:20    檢測下限:3ppb

5.3.4 奶粉處理方法:

1)稱取0.5±0.02g均質物至10ml聚苯乙烯離心管中,加入5ml去離子水,振蕩,使其充分溶解;

2)取100µl樣本液與400µl復溶液(配液3)混合,振蕩1分鐘;

3)取50µl液體用于分析。

樣本稀釋倍數:50    檢測下限:6ppb

5.3.5 雞蛋處理方法:

1)稱取1.0±0.02g均質物至10ml聚苯乙烯離心管中,加入5ml去離子水,振蕩,使其充分溶解;

2)取100µl樣本液與400µl復溶液(配液3)混合,振蕩1分鐘;

3)取50µl液體用于分析。

樣本稀釋倍數:30    檢測下限:3ppb

 

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