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2023-4-25 閱讀(203)
常用的方法是使用溶液法進行蛋白質提取(例如RIPA裂解物),但是在蛋白質提取中通常會產生兩種不同的成分,即RIPA可溶性和RIPA不溶性成分。通常,RIPA不溶成分會被我們直接丟棄并忽略。但是有文章證實,丟棄的RIPA不溶成分中存在許多蛋白質。換句話說,通過溶液法提取的總蛋白質不是完整的蛋白質,而只是一些可溶性蛋白質。
蛋白質的溶液提取將人工激活caspase-3和caspase-7;它還會人為地激活某些激酶活性;影響磷酸化研究;影響細胞外基質;影響定量,定性蛋白質研究。目前,通過離心柱法提取蛋白質可以解決上述問題。只需通過柱子添加裂解物和離心機,而不會產生不溶成分,就可以提取出完整的總蛋白。