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鈣調蛋白研究:作用機理及BML-SE325-0001生物活性

時間:2023/4/13閱讀:282
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Ebashi 等在 1965 年報道了細胞中存在介導鈣信號的鈣結合蛋白,隨后 Cheung 將這一類能結合鈣離子的磷酸二酯酶(PDE)激活蛋白命名為“鈣調蛋白"(calmodulin,簡稱 CaM)。 [4]

 

鈣調蛋白是一種廣泛存在于真核細胞中,進化上高度保守的一類鈣離子受體蛋白。鈣調蛋白是由148個氨基酸組成單鏈蛋白質,相對分子質量為16.7kDa。等電點為4.0 左右,是一種酸性水溶性熱穩定蛋白,可以在外界溫度很高的情況下仍可保持其良好的生物活性。不同生物來源的鈣調蛋白,其氨基酸水平極其相似,同源性也非常高,理化性質和生物學活性的相似度也很高,這對于維持多種多樣的鈣調蛋白結合蛋白家族的相互作用非常重要。 [3]

 

鈣調蛋白本身是沒有活性的,它對鈣具有絕對的依賴性。鈣調蛋白是鈣離子的胞內受體,鈣離子濃度增加時,起激發鈣調蛋白的作用。鈣調蛋白與 Ca2+結合時,因親和力的不同可分為兩種結合位點,高親和力位點可以結合一個Ca2+,低親和力位點結合 2至 3 個Ca2+,結合Ca2+之后,蛋白質α螺旋含量增加 5%-10%。Ca2+-CaM復合物能與靶酶結合,并激活靶酶,產生生物學變化,激發一系列反應。 [5]

 

鈣調蛋白作用機理:

鈣調蛋白分子本身無酶的活性,在無Ca2+的情況下,也無生物學活性;但在胞內Ca2+結合后,鈣調蛋白發生構型上的變化,暴露疏水區,疏水區與依賴于 鈣調蛋白的靶酶相互作用而調節酶的活性。 [4]  作為一個多功能的Ca2+傳感器,鈣調蛋白能夠應對不同Ca2+濃度。結合Ca2+后,鈣調蛋白會發生構象轉變,從而使含鈣的鈣調蛋白能夠與調控的目標分子結合。鈣調蛋白的結構及其Ca2+結合特性已有廣泛研究。蛋白質數據庫(PDB)中已經有超過 190個實驗測定的鈣調蛋白結構,包括結合Ca2+和未結合Ca2+的單純鈣調蛋白結構,以及結合了不同蛋白質片段的復合物結構。 [3]

 

未結合 Ca2+的無鈣 鈣調蛋白(簡稱為 apo-CaM)具有一個緊湊的結構,其 N 端和 C 端兩個結構域排列到一起。結合Ca2+后形成的含鈣鈣調蛋白(簡稱為 holo-CaM)構像會從閉合狀態變換到打開的狀態。在鈣調蛋白結構轉變的過程中,兩個結構域的構像變化會導致其暴露出疏水表面,疏水表面對于鈣調蛋白與目標蛋白的相互作用極其重要。鈣調蛋白構像的可塑性和靈活性使其能采用不用的構像,從而與不同的目標蛋白相互作用,調節這些分子的活性。Ca2+的結合所引起的鈣調蛋白的構像轉變對于發揮其調節功能起到至關重要的作用。 [2]

 

艾美捷Enzo人重組鈣調蛋白#BML-SE325-0001詳細信息:

替代名稱: CaM,磷酸二酯酶3':5'-環核苷酸激活劑

序列: 序列與Genbank加入M27319.1相同。

源: 產于大腸桿菌。

配方: 凍。無鹽。

純度: ≥95% (SDS 頁面)

純度細節:通過多步色譜純化。

生物活性:引發鈣調磷酸酶(Ca 2+/鈣調蛋白依賴性Ser/Thr蛋白磷酸酶2B,PP-2B)的Ca2+依賴性活化,其效力和很大程度與純化的天然鈣調蛋白相同。

應用說明:鈣調蛋白可用于激活鈣調蛋白依賴性磷酸二酯酶、鈣調磷酸酶、CaM 激酶等。

重構: 在水或適當的緩沖液中復溶。

航運: 藍冰

長期儲存:-20°C

處理: 避免凍融循環。復溶后,準備等分試樣并儲存在-20°C。

RUO - 僅供研究使用

 

參考資料:

1  Miao Zhang, Cameron Abrams, Liping Wang,等. Structural Basis for Calmodulin as a Dynamic Calcium Sensor[J]. Structure, 20(5)   .pubmed.2013-05-09[引用日期2020-04-08]

2  李彥,蔡永琴,岳俊杰,等.鈣調蛋白的功能性運動分析[J].生物技術通訊,2015(1):74-77   .《中文科技期刊數據庫》.2015[引用日期2020-04-08]

3  李慶偉,張撼,逄越.鈣調蛋白結構、性質及其細胞生物學功能的研究進展[J].遼寧師范大學學報(自然科學版),2017,40(01):74-82   .中國知網.2017[引用日期2020-04-08]

4  楊坤,張健,蔣華良,等.鈣調蛋白構象變化路徑[J].大連理工大學學報,2009(4):499-505.   .《中文科技期刊數據庫》.2009[引用日期2020-04-08]

5  謝甫綈,陳貴.生物體內的一種多功能蛋白—鈣調蛋白[J].沈陽農業大學學報,1990(2):176-179   .《中文科技期刊數據庫》.1990[引用日期2020-04-09]

6  楊麗亞,高菂.鈣調蛋白的藥用研究[J].西北藥學雜志,2008(2):124-125   .《中文科技期刊數據庫》.2008[引用日期2020-04-09]


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