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杭州仟諾生物科技有限公司>>技術文章>>骨髓培養基檢驗方法

骨髓培養基檢驗方法

閱讀:1304        發布時間:2020/4/20
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   骨髓培養基為細胞標本前處理試劑,用于骨髓細胞增殖培養,不具備對細胞的選擇、誘導、分化功能,培養后的骨髓細胞用于體外診斷,該產品不用于治療性用途。
  骨髓培養基檢驗方法:
  1. 種骨髓:向裝有10ml培養基的玻璃或塑料瓶中接種0.5ml的骨髓穿刺液,輕輕轉動培養管使混合。
  2. 培養:置37℃二氧化碳細胞培養箱培養72小時。
  3. 終止培養:向每個培養管中加入秋水仙酰胺溶液,終濃度為0.1ug/ml,靜置15-30分鐘。
  4. 收獲細胞:將培養液轉移至離心管中,離心力500g,離心5分鐘。
  5. 低滲處理:除去上清液,加入5-10ml 0.075M KCl溶液重新懸浮細胞,37℃孵化10-12分鐘。
  6. 離心:500g,離心5分鐘,棄去上清液。
  7. 固定:固定液為醋酸:甲醇=1:3,每個離心管中逐滴加入新鮮配制的、預冷的固定液5-10ml。置于4℃10分鐘。
  8. 再固定:重復步驟6和7。
  9. 滴片:加入0.5-1ml固定液制成懸液。用吸管吸取細胞懸液,滴至干燥潔凈的載玻片上,空氣中晾干。
  10. 經吉姆薩染色處理后做染色體核型分析。
  胎兒骨髓培養基保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。細胞服務流程:預約登記→辦理相關手續→復蘇細胞→細胞質量檢查→發送細胞(或自己來取細胞)→細胞售后技術咨詢答疑。

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