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轉(zhuǎn)染試劑的概況
轉(zhuǎn)染試劑，轉(zhuǎn)染指真核細(xì)胞由于外源DNA摻入而獲得新的遺傳標(biāo)志的過程。DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)的發(fā)展對(duì)現(xiàn)代分子生物學(xué)產(chǎn)生了影響。基因轉(zhuǎn)染技術(shù)不僅是研究轉(zhuǎn)基因和基因表達(dá)的重要工具，而且是目前基因治療的關(guān)鍵步驟。理想的基因轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)該具有如下特點(diǎn)：轉(zhuǎn)染；安全；低細(xì)胞毒性；方法簡(jiǎn)單；省時(shí)、經(jīng)濟(jì)。
人們一直在尋找更有效、毒性小同時(shí)對(duì)研究影響也小的轉(zhuǎn)染試劑。由于脂質(zhì)類轉(zhuǎn)染試劑對(duì)細(xì)胞的毒性是由其脂質(zhì)特性決定的，目前眾多的研究者和生物公司將轉(zhuǎn)染試劑的開發(fā)聚焦在非脂質(zhì)體的聚合物上，并已有一些試劑產(chǎn)品上市。其原理是：分子內(nèi)含有許多氨基，在生理PH下會(huì)發(fā)生質(zhì)子化，這些質(zhì)子化的氨基可以中和DNA質(zhì)粒表面的負(fù)電荷，使DNA分子由伸展結(jié)構(gòu)壓縮為體積相對(duì)較小的DNA粒子，并包裹在其中，使DNA免受核酸酶的降解。轉(zhuǎn)染復(fù)合物主要是通過細(xì)胞內(nèi)吞作用將DNA轉(zhuǎn)移進(jìn)入細(xì)胞，形成內(nèi)含體，DNA從內(nèi)含體釋放，進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)中，再進(jìn)一步進(jìn)入核內(nèi)轉(zhuǎn)錄、表達(dá)。