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上海易匯生物科技有限公司

Millipore MERS00002 細胞電阻儀科研應用指南

時間:2025-4-10閱讀:207

Millipore MERS00002 細胞電阻儀科研應用指南

——跨上皮/內皮細胞屏障功能研究的精準測量方案

一、儀器原理與核心功能

1.1 電阻測量技術原理

 

TEER(跨上皮電阻)檢測:

 

采用 AC 4-electrode系統(頻率12.5Hz),避免電極極化

 

測量范圍:0-20,000 Ω·cm2(分辨率1 Ω·cm2)

 

自動溫度補償(18-40℃)

 

1.2 關鍵技術創新

 

特性 MERS00002優勢 傳統伏歐計局限

電極設計 鍍金叉指電極(防腐蝕) 銀電極易硫化失效

自動化校準 一鍵校準(含空白補償) 需手動計算凈電阻值

多孔板兼容性 支持6/12/24-well inserts 僅適配單孔測量

1.3 典型研究應用

 

屏障模型構建驗證:

? 腸上皮(Caco-2)、血腦屏障(hCMEC/D3

? 肺部藥物滲透性評估

? 緊密連接調控研究(如Claudin敲除影響)

 

二、標準化操作流程

2.1 實驗前準備

 

電極維護:

 

復制

1. 使用后立即用去離子水沖洗  

2. 每月用70%乙醇消毒10分鐘  

3. 避免觸碰電極敏感區(圖示紅色區域)  

2.2 測量步驟

 

復制

1. 平衡:  

   - 細胞培養板室溫平衡15分鐘(減少溫度梯度)  

2. 校準:  

   - insert測量3次→儀器自動計算背景電阻  

3. 檢測:  

   - 電極垂直浸入液面1-2mm  

   - 穩定讀數(波動<2%持續5秒)后記錄  

2.3 數據標準化處理

 

TEER計算公式:

TEER (Ω·cm2) = (R_sample - R_blank) × 膜面積(cm2)

 

示例計算:

 

復制

測得電阻:350 Ω  

空白電阻:80 Ω  

Insert面積:0.33 cm2  

TEER = (350-80)×0.33 = 89.1 Ω·cm2  

三、性能驗證與問題排查

3.1 質量控制標準

 

合格指標:

? 空白電阻CV<5%(同批次inserts

? 標準電阻液(100Ω)測量誤差<2%

? Caco-2單層第7TEER300 Ω·cm2

 

3.2 典型問題診斷

 

現象 可能原因 解決方案

讀數漂移 電極污染/氣泡干擾 清潔電極/輕敲除氣泡

TEER值異常低 細胞單層破損 顯微鏡檢查完整性

負值顯示 空白未校準/電極反接 重新校準/檢查電極方向

3.3 應用案例數據

案例1:腸道屏障藥物評估

 

結果示例:

 

復制

對照組:420±35 Ω·cm2  

藥物X處理:180±22 Ω·cm2(p<0.001)  

案例2BBB模型優化

 

TEER動態變化:

 

復制

3天:85±12 Ω·cm2  

7天:650±45 Ω·cm2(達到研究閾值)  

四、技術問答(Q&A

Q1:能否用于氣液界面(ALI)培養?

 

需配合 專用ALI適配器(Cat. MERSALI01),測量前加入50μL PBS潤濕

 

Q2:如何判斷細胞單層形成?

 

TEER達到平臺期(連續3天變化<10%+ 熒光素鈉滲透率<0.5%/h

 

文檔優化建議:

 

插入 【電極維護示意圖】 標注敏感區域

 

添加 TEER計算模板 二維碼(鏈接至Excel工具)

 

關鍵步驟用 ??警示框 強調(如"禁止高壓滅菌電極"


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