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液相色譜有哪些種類?

閱讀:4108        發布時間:2019/5/28
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 液相色譜是一類分離與分析技術,其特點是以液體作為流動相,固定相可以有多種形式,如紙、薄板和填充床等。在色譜技術發展的過程中.為了區分各種方法,根據固定相的形式產生了各自的命名,如紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。

 

液相色譜按其分離機理,可分為四種類型。

吸附色譜法
吸附色譜法的固定相為吸附劑,色譜的分離過程是在吸附劑表面進行的,不進入固定相的內部。與氣相色譜不同,流動相(即溶劑)分子也與吸附劑表面發生吸附作用。在吸附劑表面,樣品分子與流動相分子進行吸附競爭,因此流動相的選擇對分離效果有很大的影響,一般可采用梯度淋洗法來提高色譜分離效率。
在聚合物的分析中,吸附色譜一般用來分離添加劑,如偶氮染料、抗氧化劑、表面活性劑等,也可用于石油烴類的組成分析。

分配色譜法
這種色譜的流動相和固定相都是液體,樣品分子在兩個液相之間很快達到平衡分配,利用各組分在兩相中分配系數的差異進行分離,類似于萃取過程。
一般常用的固定液有β,β'-氧二bing腈(ODPN)、聚乙二醇(PEG400~4000)、*撐乙二醇(TMG)和角鯊烷(SQ)。采用與氣相色譜(GC)同樣的方法,將固定液涂漬在多孔的載體表面,但在使用中固定液易流失。目前,應用較多的是鍵合固定相。在這種固體相中,固定液不是涂在載體表面,而是通過化學反應在純硅膠顆粒表面鍵合上某種有機基團。
例如,利用氯代十八烷基硅烷與硅膠表面的羥基(-OH)之間的反應就可以形成一烷基化表面。這種固定液的優點是不易被流動相剝蝕。在分配色譜法中,流動相可為純溶劑,也可以采用混合溶劑進行梯度淋洗,其極性應與固定液差別大一些,以避免兩者之間相溶。通常可分為正相分配和反相分配,如圖1所示。

分配色譜的分配類型
離子交換色譜
離子交換色譜通常用離子交換樹脂作為固定相。一般是樣品離子與固定相離子進行可逆交換,由于各組分離子的交換能力不同,從而達到色譜的分離。
離子交換色譜法是新發展起來的一項現代分析技術,已廣泛用于氨基酸、蛋白質的分析,也適合于某些無機離子(NO3-、SO42-、Cl-等無機陰離子和Na+、Ca2+、Mg2+、K+等無機陽離子)的分離和分析,具有十分重要的作用。

凝膠色譜法
目前,凝膠色譜法既適用于水溶液的體系,又適用于有機溶劑的體系。當所用的洗脫劑為水溶液時,稱為凝膠過濾色譜,其在生物界的應用比較多;采用有機溶劑為洗脫劑時,稱為凝膠滲透色譜,在高分子領域應用較多。
上述的四種不同類型的液相色譜.可以依據樣品性質的不同,選擇不同的方法。

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