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上海徠同生物科技有限公司

HSF95 Insect Cell Medium 昆蟲培養基 CW003(2025 版)產品介紹

時間:2025-4-23閱讀:78
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HSF95 Insect Cell Medium 昆蟲培養基 CW0032025 版)產品介紹

一、產品概述

CW003 昆蟲培養基專為 sf9、High Five 等昆蟲細胞的懸浮培養和瞬時表達設計,內含細胞生長所需的全部營養成分,無需額外添加其他物質即可直接使用,極大簡化了實驗操作流程。

二、核心優勢

  1. 無血清配方:有效避免血清批次差異、外源因子污染等問題,為細胞培養提供更穩定的環境。

2.   即用型設計:開箱即可使用,無需進行復雜的成分添加和調配,節省實驗準備時間。

3.   高效培養:支持 sf9High Five 等昆蟲細胞的懸浮培養馴化與高密度培養,顯著提升細胞培養效率。

4.   基因表達支持:與桿狀病毒載體表達系統高度適配,可高效生產重組基因蛋白,為科研與生產提供可靠保障。

三、基礎參數

(此處待補充具體基礎參數內容)

四、使用方法

(一)細胞馴化與傳代

  1. 培養條件:溫度設定為 27℃,搖床轉速保持在 110 - 130 rpm;傳代時,細胞密度需控制在 0.8 -      1.2×10? cells/mL,以維持細胞的良好生長狀態。

2.   直接馴化:在多數情況下,使用其他培養基培養的 sf9、High Five 細胞,可直接通過日常傳代稀釋的方式更換至 CW003 培養基,細胞能夠自然適應新的培養環境。

3.   漸進式馴化

    • 操作要點:選擇低代次且處于對數生長期的細胞進行馴化。

    • 具體步驟:首先在原培養基中復蘇細胞,并使用原培養基連續傳代 2 - 3 次,直至細胞生長穩定。隨后,采用原培養基與 CW003 培養基混合的方式逐步馴化(CW003 比例從 25% 逐步遞增至 90%),傳代細胞密度控制在 0.8 - 1.1×10? cells/mL,每 48 小時傳代一次。當細胞在含 90% 以上 CW003 培養基中生長狀態良好后,可嘗試將細胞傳代至 100% CW003 培養基,并連續傳代 3 - 4 次。若細胞仍能保持穩定生長,即表明細胞已成功適應 CW003 培養基。

(二)細胞復蘇

  1. 從凍存設備中迅速取出細胞,在 37℃水浴環境下快速解凍,解凍過程中可輕輕晃動凍存管,確保解凍均勻,整個過程需控制在 120 秒以內,當凍存管內僅剩余小塊冰晶時停止。

2.   在生物安全柜內,將融化后的細胞全部轉移至無菌離心管中,加入 10 mL 預熱至 37℃的培養基,以 175 g 的離心力離心 5 分鐘,棄去上清液,再加入 20 - 30mL 預熱至 37℃的新鮮培養基重懸細胞,最后轉移至搖瓶中進行培養。

(三)細胞凍存

  1. 凍存細胞應選擇處于對數生長期、狀態良好且活力≥98% 的細胞,以保證凍存后細胞的復蘇成功率。

2.   提前計算所需凍存的細胞管數和培養基體積,凍存密度推薦為 2.5 - 3.5×10? cells/ml/ 支(常規凍存濃度為 1.0 - 2.0×10? cells/ml/ 支)。

3.   凍存液配制:將 45% 新鮮培養基、45% 原培養基(上清)和 10% DMSO 充分混合均勻,配制好的凍存液存放于 4℃環境,建議當天配制當天使用。

4.   175 g 離心力離心 5 分鐘收集細胞,棄去上清液,使用 4℃預冷的凍存培養基重懸細胞。

5.   將重懸后的細胞液迅速分裝至無菌凍存管中,每管 1ml,并做好清晰的標簽標記。

6.   將細胞凍存管放入填充有異丙醇并經 4℃預冷的程序降溫凍存盒中,置于 - 80℃冰箱(降溫速率為每分鐘下降 1℃)過夜,次日將細胞轉入液氮罐中長期保存。

上述潤色使產品介紹更專業規范。若你覺得某些部分還需調整,或想補充更多信息,歡迎隨時告訴我。

 


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