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上海徠同生物科技有限公司

Zeta Life轉染試劑解決RAW264.7轉染效率低的問題2024更新

時間:2024-11-27閱讀:201
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Zeta Life轉染試劑解決RAW264.7轉染效率低的問題2024更新

 

RAW264.7細胞轉染效率低怎樣提高轉染效率一直是困擾實驗者的一道難題,特別對于比較大的質粒DNA的轉染更是困難;我們實驗室用美國Zeta Life公司Advanced DNA RNA轉染試劑貨號AD600150轉染raw 264.7細胞整理了一套優化方案希望對大家轉染raw 264.7細胞提高轉染效率有一定的幫助。

下圖是用美國Zeta Life公司Advanced DNA RNA轉染試劑貨號AD600150在6孔板轉染8000bp左右的pEGFP-C1r到RAW264.7細胞的熒光和細胞明場圖片。

 

圖片1.png

 

圖片2.png

 

提高轉染raw 264.7細胞條件如下

一、質粒DNA準備

1、質粒DNA濃度700ng/ul(注意:①溶解于無菌雙蒸水或超純水;②無內毒素),我用QIAGEN試劑盒除去的內毒素

二、操作流程

1、先將細胞接種到細胞培養板,細胞匯合度在70%左右,再進行轉染。

2、復合物制備:將質粒DNA與Zeta Life公司Advanced DNA RNA貨號AD600150轉染試劑按照1:1(12ug:12ul)關系直接混合,用移液器吹吸10-15次混勻,室溫靜止10-15分鐘。

3、將復合物加入*培養基的細胞培養板,并輕輕混勻,放入培養箱中繼續培養(不建議把復合物加入到無血清的培養基里面,我后期會進一步摸索此條件)。

4、轉染24小時后對細胞進行正常換液。

5、質粒DNA轉染48小時后熒光檢測轉染效率

三、注意事項:

1本轉染方法不適用在下面轉染試劑的轉染如:lipo3000、,FuGENE 6、FuGENE HD、Effectene等;

2細胞培養Zeta Life z7181-500胎牛血清,Gibco的DMEM;

四、美國Zeta Life公司Advanced DNA RNA轉染試劑信息:

產品名稱

貨號

規格

數量

報價

Advanced  DNA RNA  轉染試劑

AD600025

0.25ML

1

1590

Advanced  DNA RNA  轉染試劑

AD600050

0.5

1

2390

Advanced  DNA RNA  轉染試劑

AD600075

0.75

1

2890

Advanced  DNA RNA  轉染試劑

AD600150

1.5ML

1

4490

Advanced  DNA RNA  轉染試劑

AD600500

5ML

1

電詢

Advanced  DNA RNA  轉染試劑

AD601000

10ML

1

電詢

 


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