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上海徠同生物科技有限公司

NuSmart®核酸直接釋放技術在EDTA抗凝血中應用2

時間:2024-8-14閱讀:131
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NuSmart®核酸直接釋放技術在EDTA抗凝血中應用2

血常規檢測中最經常使用的就是EDTA抗凝血,它能夠用于血細胞形態、生化檢測、血型鑒定、標志物檢測、基因篩查等。常見的基因篩查都涉及到核酸提取和擴增。檢驗科或者實驗室最常使用的方法就是離心柱或者磁珠提取法進行DNA或者RNA提取。但是以上方法有以下盲點:

1、離心柱提取無法自動化,一次提取量受限于離心機規模,而且無法高通量操作;

2、磁珠提取法雖然能夠高通量,但是設備昂貴;

3、離心柱或者磁珠提取血量一般不低于200-300µL;

4、離心柱提取的核酸含量比較高,而磁珠依據廠家不同得率不穩定;

5、前處理時間比較長;

6、離心柱的批間差異相對于磁珠更好控制;

綜上所述,兩種方法各有優缺點,在通量、效率、自動化上很難兩全。鑒于此情況,我司開發的NuSmart®核酸直接釋放技術和EDTA血檢測相結合,僅需要10-20抗凝血,同時可以處理百份甚至千份血液。所含試劑中不包含有生物酶制劑,例如蛋白酶K,所以批間差異很小。總結如下:

— EDTA血量少

— 5分鐘處理

— 高通量樣本量

— 無腦操作

— 無需大型設備

 

操作流程

圖片1.png

 

案例A 不同體積人EDTA抗凝血處理后擴增4對引物

圖片2.png

圖片3.png

 

1、0.1μL   2、1μL   3、10μL   4、20μL   5、50μL   6、100μL   7、200μL

使用NuSmart®血液 PCR 試劑盒Plus(貨號Nu-B02)處理不同體積人EDTA抗凝血,使用2×Master TaqMix(With Dye)分別擴4對引物。

 

案例B 人EDTA抗凝血處理后在50μL體系下擴增

圖片4.png

圖片5.png

 

1、1μL   2、2μL   3、5μL   4、10μL   5、15μL   6、20μL   7、23μL

使用NuSmart®血液 PCR 試劑盒Plus(貨號Nu-B02)處理10μLEDTA抗凝血。在50μL擴增體系中,使用1μL到23μL模版體積擴增4對引物

 


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