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上海徠同生物科技有限公司

Biozellen系列3D類器官培養基質膠應用

時間:2022-1-18閱讀:333
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3D類器官培養基質膠

一、產品優勢

1、基質膠為植物源:

A.無人畜共患病的病原菌或毒素污染

B.氨基酸序列100%人源化

C.成本低且易規模化大量生產

D.3D培養結束后基質膠可以融化

2、可用作醫療生物原料:

A.高安全、低過敏

B.高活性、高純度

C.最是適合人體研究

3、符合人體癌藥篩檢:

A.低成本且穩定

B.3D癌組織培養系統

C.可用于精準人體癌藥篩檢

4、滿足生物原料需求:

A.自產關鍵原料

B.低成本

C.降低批次差異

D.人源化原料更精準

二、應用

• 3D 類器官培養。

• 適合用于 3D 類器官藥物篩檢平臺

三、適用細胞種類

• 原代細胞

• 干細胞

四、試劑盒組分

五、使用步驟:

A、試劑制備

A 基質膠:將A 基質膠溶于 37℃水浴槽回溫 10分鐘, 確認*融解.

C 緩沖溶液(1X)制備: 使用前將 10X C 緩沖溶液用冰的無細胞培養液(例如:無血清 DMEM、 opt-MEM) 制

備成 1X C 緩沖溶液。(不要用 PBS 稀釋 C 緩沖液) .

D 緩沖溶液(1X)制備: 使用前用冷的 1x PBS 稀釋 10X D 緩沖溶液至 1X D 緩沖溶液.

B、Biozellen®3D 類器官培養基質膠的制備

全部步驟需要在無菌環境內操作,操作步驟如下:

1. 將 24孔培養板放置于冰上預冷。

2. 細胞計數后取 2×105~2×107 細胞與 0.5 毫升 37℃ 培養基均勻混合,并與 0.5毫升 37℃ A 膠按照

1:1 等比例均勻混合,最終細胞密度105~107cells/mL。

注:請選擇適當的培養溶液與條件進行試驗,貼壁細胞應在~80% 匯合度下培養。

3.取 20-40 微升步驟 2 含細胞的混合 A 膠溶液滴于 步驟 1 預冷的培養板上, 膠體將于 5 分鐘內成膠。

注: 測試膠體是否成膠,可用微量吸管尖溫和的觸碰膠體表面進行確認。

4.待膠體成膠后,添加 1 毫升冰的1X C 緩沖溶液,并蓋過步驟 3 的膠溶液,固定 15 分鐘。

5.待 15分鐘固定后,小心的吸取 C 緩沖溶液并置換為適合此細胞生長之培養基溶液。

6將含有細胞的膠于 37°C 二氧化碳培養箱內進行7~14天的培養,并觀察細胞球體的形成,按正常培養基

更換頻率進行更換操作。

C、溶膠與收集細胞球體準備程序

小心的將培養基吸取移除,并用 1X PBS 進行清洗。

小心的將 1X PBS 吸取移除,并添加 1 毫升冰的 D 緩沖溶液,蓋過膠滴于室溫反應 5 分鐘。

溫和的用 1毫升移液管吸取,直到膠滴*溶解。

將含有細胞球體的溶液吸入 1.5 毫升離心管,用1000 rpm的轉速離心 10分鐘,移除上清液體并收集細胞

球體做分析。

D、收集單顆細胞準備程序

在分離單細胞前,先按上述溶膠與收集細胞球體準備程序進行操作

1. 添加 trypsin-EDTA并與收集的細胞球體于 37°C 混合反應。

2. 用 1毫升移液管混合,直到細胞體*分解。

3. 待細胞球體*分解,加入 3 倍體積的 1X PBS,并用 1000 轉的轉速進行離心 10分鐘,并移除上清

液體收集沉淀的單細胞做分析。


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