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上海徠同生物科技有限公司

CELL-WISE 293培養基品牌產品特點介紹

時間:2022-1-7閱讀:138
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CELL-WISE 293培養基* 產品資料:

Balance CD 293 培養基適用于懸浮培養條件下的HEK293細胞(如293-F,293-T, Expi-293F等)的高密度生長和瞬時轉染表達。 Balance CD 293 培養基含有細胞生長所需的全部營養成份,無需添加任何添加物即可使用。(注意:此培養基不包含抗生素以及血清)

cell-wise 293無血清培養基

CELL-WISE 293培養基品牌產品特點:

瞬時轉染用培養基,適用于HEK293細胞高密度懸浮培養

無蛋白、無動物源、化學成分限定

即用型*培養基,無需添加額外成分

CELL-WISE的293培養基參數規格:

外觀:

澄清透明紅色液體

滲透壓:

275±15 mOSM

pH:

6.9-7.4

無菌檢測:

無菌

內毒素:

<5 EU/mL

儲存條件

:2-8℃,避光

效期:

12個月

產品用途:

僅用于科學研究,不適用于人類或動物的診斷和治療

CELL-WISE的293培養基使用方法:

細胞馴化

1)直接馴化

大部分情況下,培養于其他培養基中的細胞,可以直接適應Balance CD 293 medium,只要按照日常傳代方式(稀釋)更換培養基即可。

2)漸進式馴化

注意:選用低代次、處于對數生長期的細胞進行馴化

①在原培養基中復蘇細胞并繼續使用該培養基傳代2到3次至細胞生長穩定,當細胞密度達到2x10 6 cells/ml后進行傳代,傳代細胞密度控制在0.5-0.6×10 6 cells/mL,5-10%血清的傳統培養基或其他無血清培養基與Balance CD 293培養基的比例為75:25;

②將細胞置于37℃,5% CO2,轉速為110-175 rpm的恒溫搖床中進行培養;

③當細胞密度3-4天后達到3x10 6 cells/ml且細胞活率>90%,傳代時5-10%血清的傳統培養基或其他無血清培養基與Balance CD 293培養基的比例為50:50,細胞密度控制在0.5×10 6 cells/mL。如細胞生長慢,可離心上清,留20%條件培養基,加入80%的5-10%血清的傳統培養基或其他無血清培養基與Balance CD 293 培養基比例為75:25的混合培養基,繼續培養;

④重復步驟③逐步增加Balance CD 293培養基所占的比例(5-10%血清的傳統培養基或其他無血清培養基與Balance CD 293 培養基的比例為25:75至10:90)直到100%的Balance CD 293培養基;

⑤經過在100%的 Balance CD 293 培養基中的幾次傳代培養,傳代后3-4天細胞的密度可以達到2-3×10 6 cells/mL,細胞活率大于90%,這說明細胞已經*適應了Balance CD 293 培養基。之后進行細胞的傳代培養時,細胞的起始密度可以降到0.3×10 6 cells/mL,般傳代2-3次后再進行轉染實驗。

注意: 般細胞馴化過程中,三代細胞的狀態可能不是很好,但般從第四代狀態會有改善。

細胞傳代

1)取細胞培養樣品,人工或儀器測定細胞密度以及活率;

2)計算傳代所需的細胞用量,建議起始細胞密度為0.2-0.4×10 6 cells/mL。建議復蘇的細胞至少培養兩代后再用于其他用途。傳代培養體積建議為15-20 mL(100 mL的培養瓶)或50-60 mL(250 mL 的培養瓶);

3)將細胞置于37℃,5%CO2,轉速為110-175 rpm的恒溫搖床中進行培養,3-4天傳代次。

細胞轉染在Balance CD 293培養基中,采用商業化轉染試劑(例如 Gibco 293Fectin™ExpiFectamine™ 293 Transfection Kit )或 PEI 可以實現對 HEK293 細胞的高效轉染。


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