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上海徠同生物科技有限公司

ArcticZymes品牌DNA檢測應用推薦PCR去污染試劑盒

時間:2021-12-23閱讀:274
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描述

在研究和診斷中,PCR是一種檢測DNA是否存在的敏感方法。PCR中使用的聚合酶經常被E.coli DNA污染。當檢測少量細菌DNA時,污染的DNA可能導致靈敏度降低和假陽性。其他污染源可能是dNTPs、緩沖體系、引物/探針,以及操作過程中引入的DNA污染。一般來說,對細菌的檢測和分型采用16S或23S rDNA基因保守區段為靶點的廣譜范圍探針。該方法對細菌DNA污染非常敏感,而大多數Master mix和聚合酶中都發現細菌DNA的痕跡。當使用qPCR檢測或定量少量的細菌DNA時,污染的E.coli DNA可能會導致假陽性結果。

為了解決這個問題,我們開發出PCR去污染試劑盒,既能去除Master mix中細菌DNA污染,又不影響PCR反應的靈敏度。此外,該試劑盒無RNase活性。

優勢

1. 減少背景污染,提高目標基因檢測下限;

2. 不影響PCR檢測靈敏度;

3. 簡單易用,操作方便。

應用 1. 去除PCR及RT-PCR的mastermix中E.coli內源DNA污染及其他DNA污染;

2. 用于終點PCR和探針依賴的qPCR;

3. 用于細菌檢測及基因分型;

4. 用于古細菌DNA檢測。

組分及特性

dsDNase:雙鏈特異性DNA酶,去除Master mix、引物及探針等的污染DNA;

DTT:60℃條件下,能夠不可逆滅活dsDNase,確保模板DNA不被清除。

不降低反應靈敏度 DNA污染是高靈敏度應用面對的主要問題。這些應用,以低豐度DNA為目標檢測基因,易受到污染DNA的干擾。因此,任何影響PCR靈敏度的去除DNA污染的方法,都是不能使用的。

Figure 2. 用PCR去污染試劑盒處理/未處理的mastermix、5個10倍梯度稀釋的gDNA和水(NTC)為模板進行qPCR檢測。與NTC untreated組相比,NTC decontaminated組在45個cycle仍然沒有信號,說明PCR去污染試劑盒能程度去除mastermix中的污染。PCR去污染試劑盒處理/后數據相比,Cq值并沒有明顯改變,說明基本不影響反應靈敏度。

訂購信息

ArcticZymes Technologies成立于20世紀80年代后期,總部位于挪威。從海洋生物中識別新的冷適應酶,用于分子研究、體外診斷和治療域。


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