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上海徠同生物科技有限公司

CCK-8法檢測不同濃度化合物對細胞增殖活性影響

時間:2021-11-16閱讀:1391
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CCK-8法檢測不同濃度化合物對細胞增殖活性影響

實驗儀器與試劑

表格一:實驗儀器

儀器

細胞培養箱

酶標儀  

表格二:試劑

試劑

廠家

MEM培養液(MCF-7細胞)

Hyclone

RPMI1640培養液(GES-1細胞)

Hyclone

胎牛血清

Gibco

CCK-8試劑

Biosharp



一、         實驗步驟

1、細胞消化、計數、配制成濃度為5×104/mL 的細胞懸液,96孔細胞培養板中每孔加入100μL 細胞懸液(每孔5×103個細胞);

2、  將細胞培養板置于37℃5%CO2 培養箱中培養過夜;

3、  使用*培養液(90%培養液+10%胎牛血清)分別配置含不同濃度化合物的工作液,混合均勻

4、  每孔加入100μL相應工作液,每種濃度設置3重復;

5、  細胞在37℃5%CO2培養箱中培養24h后棄上清液,新鮮培養液洗滌每孔細胞1次;

6、  96孔板進行CCK-8染色,λ=450nm,測定OD值:

1)     每孔加入100μL CCK-8工作液(V培養液 V CCK-8原液 =101),在培養箱中繼續培養2小時;

2)     λ=450nm,酶標儀讀出每孔的OD 值,計算細胞增值率。

7、  計算各組細胞增值率

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