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分析細胞常見的消化液2017/4/20
ATCC細胞取材進行原代培養時常常需要將組織塊消化解離形成細胞懸液，傳代培養時也需要將貼壁細胞從瓶壁上消化下來，常用的消化液有胰酶(Trypsin)溶液和edta溶液，有時也用膠原酶(collagen...
結晶紫檢測法檢測細胞生長2017/4/18
1．腫瘤細胞在96孔細胞培養板各孔中加0.1ml含5×104～10×4WEHI-164細胞的培養液（含10％小牛血清的RPMI-1640培養液），37℃5％CO2的二氧化碳培養箱中培養2～3小時，讓細...
質粒轉染細胞實驗操作步驟2017/4/13
1.1轉化細胞細胞鋪板：將細胞按70%的匯合度接種到96孔板。1.2轉染：16h后轉染螢光素酶報告基因質粒和RNA，每個樣品設置6個復孔(1)配制DNA和轉染試劑:96孔板轉染質粒時每孔比例為pLen...
小白鼠染色體的制備實驗方法和步驟2017/4/11
(一)轉化細胞秋水仙素處理取骨髓前3～4小時先給小白鼠經腹腔注入0.1％的秋水仙素，注射劑量為4毫克／每公斤動物體重。(二)取骨髓經秋水仙素處理的小白鼠，可用損傷脊髓法處死，然后用剪刀剪開大腿上的皮膚...
細胞凋亡的變化分析2017/4/6
轉化細胞凋亡大多為生理性死亡，是細胞衰老過程中各個細胞功能逐漸減退的結果。凋亡可見于許多生理和病理過程中，如各種更替性組織衰亡更新，也可見于照射及應用細胞抑制劑和數目性萎縮之時。腫瘤細胞也發生凋亡。這...
ATCC細胞培養中使用血清的缺點2017/4/1
ATCC細胞培養中使用血清的缺點血清成分復雜，雖含許多對細胞有利成分，也含有對細胞有害的成分，使血清有幾個明顯的缺點：1.對大多數細胞，在體內狀態，血清不是它們接觸的生理學液體，只是在損傷愈合以及血液...
新生大鼠頸上交感神經元分散細胞培養2017/3/30
干細胞交感神經系統在維持機體的正常功能和對環境的適應性反應中起著十分重要的作用。交感神經細胞培養特別有助于神經細胞發育和可塑性研究，利用體外培養系統可進行交感神經細胞的發生、死亡、形態和生化發育、遞質...
CO2培養箱如何消毒2017/3/28
干細胞CO2培養箱如果是隔水式培養箱可以采用甲酸熏蒸(甲醛與高錳酸鉀反應生成甲酸)，然后再用75%酒精擦培養箱內壁即可，效果比較好。如果是氣套式的培養箱用75%酒精直接擦培養箱內壁即可，或采用隔水式熏...
冷凍細胞活化操作2017/3/23
1、ATCC細胞冷凍細胞之活化原則為快速解凍，以避免冰晶重新結晶而對細胞造成傷害，導致細胞之死亡。2、細胞活化后，約需數日，或繼代一至二代，其細胞生長或特性表現才會恢復正常(例如產生單株抗體或是其它蛋...
冷凍ATCC細胞活化技術分析2017/3/21
冷凍ATCC細胞之活化原則為快速解凍，以避免冰晶重新結晶而對細胞造成傷害，導致細胞之死亡。細胞活化后，約需數日，或繼代一至二代，其細胞生長或特性表現才會恢復正常(例如產生單株抗體或是其它蛋白質)。材料...
骨髓瘤細胞懸液的制備方法分析2017/3/16
zui常用的干細胞系為SP2/0和NS-1，均來自BALB/c小鼠骨髓瘤。一般在準備融合前的兩周就應開始復蘇骨髓瘤細胞，為確保該細胞對HAT的敏感性，每3～6個月應用8-氮雜鳥嘌呤篩選一次，以防止細胞...
腫瘤細胞培養實驗操作分析2017/3/14
腫瘤細胞培養實驗原理：是將機體內的某組織取出，分散成單細胞，在人工條件下培養使其生存并不斷生長、繁殖的方法。借助這種方法可以觀察細胞的分裂繁殖、細胞的接觸抑制、以及細胞的衰老，死亡等生命現象。腫瘤細胞...
細胞消化的操作步驟2017/3/9
1.絕大部分干細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細胞。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續這樣傳...
死活細胞測定及細胞活力測定實驗原理2017/3/7
(1)干細胞細胞膜通透性的差異：活細胞的細胞膜是一種選擇性膜，對細胞起保護和屏障作用，只允許物質選擇性的通過;而細胞死亡之后，細胞膜受損，通透性增加。(2)死活細胞在代謝上的差異：由于活細胞中新陳代謝...
腫瘤細胞分離中需要注意的幾個問題2017/3/2
1.如果您要做腫瘤細胞培養，記住實驗中所用的試劑(分離液，洗滌液等)、器械等都要是無菌消毒的，并注意實驗中的無菌操作。2.離心轉速單位及時間：目前國外的文獻報道基本上用g為單位，注意g和轉速(rpm)...
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