化學染色法

染色計數法是細胞培養中檢查細胞死活zui常用的方法,直接利用死細胞和活細胞對染料的不同親和力,檢查細胞活性,能在光學顯微鏡下觀察到染色結果.可分為兩類:死細胞著色法和活細胞著色法.使死細胞著色的常用染料有臺盼藍,苯胺黑,伊紅Y.能使活細胞著色的常用染料有結晶紫,亞甲基藍,甲苯胺藍等.其中zui常用的是臺盼藍染色法….細胞損傷或死亡時,臺盼藍可穿透變性的細胞膜,與解體的DNA結合,使其著色,而活細胞能阻止染料進入細胞內,故可以鑒別死細胞與活細胞.通過細胞計數可得出細胞的存活率.

優點：方便實用，價格低廉，操作簡單

缺點：時間不宜過長,否則部分活細胞也會著色,會干擾計數.而且,細胞沒有經過固定,形態不清晰.

熒光染色法

一些熒光染料對死細胞和活細胞也有不同的作用效果,利用熒光顯微鏡檢測細胞活性.如碘化丙錠。(PI),被活細胞排斥但能穿透正在死亡或已經死亡細胞的細胞膜,因此活細胞不被染料染上色,只有死細胞或是凋亡細胞才能染上紅.色.葉啶橙(AO)能透過質膜完整的細胞,嵌入細胞核DNA,使之發出明亮的綠色熒光.溴化乙錠(EB)僅能透過胞膜受損的細胞,嵌入核DNA,發橘紅色熒光.也可應用AO—EB雙染法鑒定細胞死活.

優點：這種檢測方法相比傳統的染料,具有靈敏度高,操作簡便,結果容易分辨等特點,而且利用雙染法還可以分辨活細胞,凋亡早期細胞,凋亡晚期細胞,死亡細胞，在細胞凋亡的檢測上有很廣泛的應用。

缺點：要求特殊的儀器進行檢測,如熒光顯微鏡,激光掃描共聚焦顯微鏡或流式細胞儀.而且通常熒光染料具有毒性,操作作時需要帶手套.