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結(jié)晶紫ELISA試劑盒

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更新時間:2023-04-12 10:45:55瀏覽次數(shù):1358

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
結(jié)晶紫ELISA試劑盒是利用酶聯(lián)免疫吸附測定法用于食品中結(jié)晶紫/陰性結(jié)晶紫的定量測定。靈敏度為0.01ppb。

詳細(xì)介紹

結(jié)晶紫酶聯(lián)免疫反應(yīng)測試盒

結(jié)晶紫ELISA試劑盒特點(diǎn) :

高回收率(80-95%),快速地從魚蝦或者水樣中提取結(jié)晶紫試劑盒也可以檢測隱性結(jié)晶紫,檢測前先用提供的氧化液將隱性結(jié)晶紫轉(zhuǎn)變成有色結(jié)晶紫。96孔高通量定量檢測,魚或者蝦樣品的檢測下限為)0. 1PPB制備好的樣品,可以直接用于LC或者LC/MS確認(rèn),高重復(fù)性結(jié)晶紫酶聯(lián)免疫反應(yīng)檢測試劑盒是利用競爭性的酶聯(lián)反應(yīng)原理定量檢測分析結(jié)晶紫在魚、蝦以及魚池或者魚缸水樣中的含量。


結(jié)晶紫ELISA試劑盒原理:

實(shí)驗(yàn)方法基于競爭性酶聯(lián)反應(yīng)原理。徹孔板上包被有 cv的特異性抗體。測試分析時.樣品和 CV- HRP耦合物共同孵育。如果樣品中含有CV抗原,就會競爭抗體,從而陌止CV-HRP耦合物與抗體結(jié)合。加入HRF耦合物的底物在加入底物后將催化底物 顯 色 . 根 據(jù) 顏 色 反 應(yīng) 的 靈 敏 度 來 確 定 樣 品 中C V的 濃 度 。 顏 色的深淺同樣品中藥物的濃度成反比矢系。


注意事項(xiàng):

i>標(biāo)準(zhǔn)品中含有結(jié)晶紫,請小心使用。

2>不要使用過期的試劑盒。

3)不同批次的試劑盒不要混用,抗體和微孔板具有盒與批次的特異性。確保二抗及二抗稀釋液正確配制。

4>盡 M保持室溫20-25 V,避免在通風(fēng)口操作防止溫度過低,過熱和/或者蒸發(fā)。同樣的,不要在陽光直射下實(shí)驗(yàn),防止過熱及蒸發(fā)a在 孵 W 期間,如果工作臺溫度過低,應(yīng)該鋪墊若干紙巾或者其他物料。

5>水質(zhì)量很里要,確保使 m蒸餾或者去離子水。

6>加入樣品或者試劑到空的微孔板時,吸嘴靠于微孔接近底部,并保持接觸。

7>孵育時間的計(jì)算越規(guī)范越好,保持添加標(biāo)準(zhǔn)品的一致性,先添加標(biāo)準(zhǔn)品后添加樣品。

8>從低濃度到高濃度地添加標(biāo)準(zhǔn)品,降低影響標(biāo)準(zhǔn)品曲線質(zhì)的風(fēng)險。

9>將微孔板置于放有千燥劑的密封袋中,冷藏保存。

試劑盒組成:

已包被抗體的酶標(biāo)板 (CRYSTAL VIOLET AB-COATED

PLATE)( 可拆式)

12x8 孑 L

標(biāo)準(zhǔn)液( STANDARDS) (0 , 0.OS , 0.15 , O.S , 1.S , 4.S

NG/M L ) 6 x 1 .8 M L

回收用 100PPB (SPI Kl NG)( 可選)

1 x 〇 . 8 M L

CV-HRP 耦合物( CV-HRP CONJUGATE)

1 x 8 M L

2 〇 x 濃縮洗液 (WASH SOLUTION)

1 x 28 M L

終止液 (STOP BUFFER)

1 x 20 M L

TMB 底 物 (TMB SUBSTRATE)

1 x 1 2 M L

提取物 A(CONCENTRATE OF SAMPLE EXTRACTION

BUFFER A)( 包括試劑 I 和 M) 20G

1 〇 x 提取液 B (SAMPLE EXTRACTION B)

檢測步驟

(1 )加入1 00 L的標(biāo)準(zhǔn)品或樣品于所設(shè)定的孔中;

(2 )在每孔中加入50 L CV- HRP耦合物,輕敲微孔板邊緣混勻1分鐘;

(3 )避光室溫(20 - 25 °C )溫育1小時;

(4 )洗板3次,每次加入250 L 1 x洗液,后_次盡量甩干并在吸水紙上吸干;

(5 )加入100 L的 TMB底物;

(6 )在室溫下避光培養(yǎng)20分鐘,加入100 L的終止液終止反應(yīng),在450 NM下讀0 D值(底物本身是無色的,顏色發(fā)生變化不能使用。孵育時適當(dāng)覆蓋微孔板)。

試劑的準(zhǔn)備

確定樣品正確儲存.通常,樣品應(yīng)該在2-4° C下冷藏不得超過1 - 2天.如果需要長時間保存冷凍樣品低溫度-20 X.凍結(jié)的樣品在室溫(20-2 SaC / 68-77 ttF)下解凍或者在使用之前放在冰箱中保存。所有的試劑在使用之前應(yīng)將其回溫至室溫,并在使用試劑前搖動幾下,以保證合理的濃度^

(1 ) 1倍氧化劑液

根據(jù)實(shí)際上需要,按9: 1用乙腈稀釋10 x氧化劑液(1〇 X OXIDANT SOLUTION)。

(2 ) 1倍提取液A

打幵提取液A固體濃縮袋(EXTRACTION BUFFER A CONCENTRATE ),取出試劑 I和丨丨,混和加入一容 fi瓶中•加入100 ML雙蒸水,攪拌至*溶解,可在室溫(2 0-2 S °C / 68-7 7*^)下*保存。(試劑具有腐蝕性,混合攪拌時候帶手套操作)

(3 ) 1倍提取液B

根據(jù)實(shí)際上需要,按9:1用蒸餾水稀釋1〇 X 提取液B。

(4 ) 1倍提取液C液

根據(jù)實(shí)際上需要,按9:1用蒸餾水稀釋1〇 X 提取液C

(1) 分別計(jì)箅標(biāo)準(zhǔn)和樣品的平均吸光度值和相對吸光度值相對吸光度值(%) = (標(biāo)準(zhǔn)或樣品吸光度值/零標(biāo)準(zhǔn)吸光度值)*100

(2) 以相對吸光度值為縱坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線

(3) 從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取樣品的濃度值備注:如結(jié)果呈陽性反應(yīng),應(yīng)該用其他檢驗(yàn)方法(如色譜/質(zhì)譜方法等)進(jìn)行確證。


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