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上海慧穎生物科技有限公司

小鼠CD蛋白(損壞性關節炎)(YKL-40)Elisa試劑盒

時間:2014-6-17閱讀:2751

(本試劑盒僅供體外研究使用、不用于臨床診斷!)

Chinese Name/ 中文名

小鼠CD蛋白(損壞性關節炎)(YKL-40)Elisa試劑盒

English Name/ 英文名

Mouse YKL-40 ELISA Kit ELISA Kit

Catalog Number/ 目錄號

Hu84566HY

Organism/ 種屬

Human

Packing/ 規格

96T/Kit(8*12strips)/ 48T/Kit(8*6strips)

Detection Range/ 檢測范圍

3pg/ml - 180pg/ml

Sensitivity/ 靈敏度

 

Method/ 檢測方法

Sandwich-ELISA/雙抗體夾心ELISA

Sample Type/ 樣品類型

Serum, Plasma, Other biological fluids/血清、血漿等其它生物樣品

Other Names/ 其他名稱

YKL-40

Supplier Data Page/ 供應商資料

Product Description/中英文使用說明書

實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠CD蛋白(損壞性關節炎)(YKL-40)水平。用純化的小鼠CD蛋白(損壞性關節炎)(YKL-40)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入YKL-40,再與HRP標記的羊抗鼠抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的YKL-40呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠CD蛋白(損壞性關節炎)(YKL-40)濃度。

試劑盒組成

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說明書

1

1

 

封板膜

2片(48)

2片(96)

 

密封袋

1

1

 

酶標包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

標準品:270pg/ml

0.5ml×1瓶

0.5ml×1瓶

2-8℃保存

標準品稀釋液

1.5ml×1瓶

1.5ml×1瓶

2-8℃保存

酶標試劑

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑A液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑B液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

終止液

3ml×1瓶

6ml×1瓶

2-8℃保存

20倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

30ml×1瓶

2-8℃保存

操作步驟

  1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180pg/ml,120pg/ml ,60pg/ml,30pg/ml ,15pg/ml)。
  2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
  3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
  4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
  5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
  6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
  7. 溫育:操作同3。
  8. 洗滌:操作同5。
  9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
  10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
  11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

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