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上海慧穎生物科技有限公司

血清10099-141

時間:2017-5-3閱讀:2555

血清10099-141 2017年這個夏天如何選擇高品質,放心使用的血清?慧穎生物與您相伴,在實驗過程中助您一臂之力。

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胎牛血清FBS (fetal bovine serum):心臟穿刺的方法采血。剖腹產胎牛,未接觸外界,血清中的抗體補體等對細胞生長的有害成分zui少。

新生牛血清:出生24小時內

小牛血清CS(calf serum):出生10-14天

馬血清HS(horse serum)

常用的血清廠家:GIBCO|SERANA|Bovogen|Gemini|Sigma|PAA|GE Hyclone

常用貨號:10099-141|16000-044|26140-079|10099-133|10010-147|10082-147|S-FBS-SA-015|S-FBS-AU-015|900-108|100-500|F2442|SH30084.03|SH30396.03|SH30070.03|SH30068.03等

血清的溶解與保存

1、如果不用,先放置-80 ℃保存。

2、如果要用,可于4 ℃冰箱放置過夜,再在室溫溶解。

3、溶解好的血清應立即分裝,-80 ℃保存。

4、保存于-80 ℃的血清解凍時應先與4 ℃冰箱放置過夜再在室溫溶解。切勿直接放在室溫溶解。

細胞傳代方法

根據細胞生長的恃點,傳代方法有3種:

1.懸浮生長細胞傳代

   離心法傳代:離心(1000轉/分)去上清,沉淀物加新培養液后再混勻傳代。

   直接傳代法:懸浮細胞沉淀在瓶壁時,將上清培養液去除l/2一2/3,然后用吸管直接吹打形成細胞懸液再傳代。

2.半懸浮生長細胞傳代(雜交瘤)

   此類細胞部分呈現貼壁生長現象,但貼壁不牢,可用直接吹

打法使細胞從瓶壁脫落下來,進行傳代。

3.貼壁生長細胞傳代

   采用酶消化法傳代。常用的消化液有0.25%的胰蛋白酶液。

細胞冷凍保存

  1. 細胞應生長良好,處于對數生長期,密度為80%左右。
    2.注意冷凍保護劑之品質。 DMSO質量要好,應無菌且無色。
    3.  冷凍保存之細胞濃度:一般成纖維細胞1~3 x 106 cells/ml,懸浮細胞 5~10 x 106cells/ml,上皮細胞 2~5 x 106 。

4.凍存液的配方是: 60%無血清培養液 30%血清 10% DMSO

 

  1. 冷凍方法:  4℃ 30-60 分鐘---> -80℃ 6H - 隔夜 ---> 液氮長期儲存。

細胞生長減慢

提高血清濃度為15-20%;

提高接種密度;

細胞的離散度;

添加細胞生長因子;

細胞不貼壁

胰蛋白酶消化過度;

支原體污染;

培養液中無貼壁因子

細胞傳代過程中出現碎片、顆粒、小黑點的原因

排除細胞污染后主要有以下幾種可能:

細胞長老了,傳代時細胞已100%滿度,細胞衰老;

消化時不*,吹打過度;

血清溶解時直接從-80℃放到37 ℃或室溫;

 

以上資料有上海慧穎生物市場部 王麗 編輯整理

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