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廣州健侖生物科技有限公司

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結核分枝桿菌抗體檢測試劑盒(金標法)

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  • 廣州健侖生物科技有限公司
  • 2018-05-21 17:21:26
  • 廣州市
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【簡單介紹】

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結核分枝桿菌抗體檢測試劑盒(金標法),2002年8月2日,美國南部路易斯安那政府宣布全州進入緊急狀態,控制正在該州迅速擴散的“西尼羅河病毒“。

【詳細說明】

結核分枝桿菌抗體檢測試劑盒(金標法)

廣州健侖生物科技有限公司

 

檢查

1.實驗室檢查

白細胞數減少,腦炎型者腦脊液中淋巴細胞增多,蛋白增高。

2.免疫學檢查

利用血清學抗體檢測方法,常用ELISA(酶聯免疫吸附實驗)法,采用患者急性期和恢復期雙份血清,兩份血清同時進行檢測,以恢復期血清較急性期特異性IgG抗體滴度升高4倍以上為陽性,有助于本病的診斷。

3.病原學檢查

自潛伏末期至發病后第5天,從患者血液或腦脊液中分離出病毒,陽性率較高,對新分離病毒的鑒定一般采用已知血清進行中和實驗。

4.分子生物學檢查

RT-PCR(逆轉錄-聚合酶鏈反應)法檢測,通過設計西尼羅河熱病毒特異引物對血清或腦脊液標本進行RT-PCR試驗,陽性率高,具有特異性診斷價值。

用途

西尼羅(WN)病毒IgG ELISA,利用了西尼羅重組抗原檢測人體血清或血漿中的西尼羅抗體。本實驗僅用于輔助診斷人感染了西尼羅病毒,不用于篩查血液或血液成分。僅供專業人員體外診斷使用。

概述

 感染了西尼羅病毒會導致包括腦炎等一系列癥狀的疾病,西尼羅病毒在世界廣泛傳播,已在50多個國家檢測出該病毒。本試驗經CDC提供的試劑檢驗與驗證。本試驗使用了一種稱為WNRA的重組抗原,它可以作為西尼羅病毒感染的快速血清學指標,WNRA蛋白是一種重組抗原,它是由含有西尼羅病毒兩個抗原的序列多肽構成。

實驗的原理

檢測西尼羅病毒IgG ELISA 是基于兩步夾心法原理制造的。

提供的材料

  • 微孔板(96孔 12x8):即用  每孔均包被結合西尼羅重組抗原的單抗。2-8℃下保存至保質期。

注意:WNRA和NCA已包被于微孔板。

  • IgG樣品稀釋液:1支 25ml 即用 2-8℃下保存至使用。
  • IgG陰性質控:1支 30ul  2-8℃下保存至使用。要長時間儲存,將其分裝于小瓶里,在-70℃下儲存。
  • IgG陽性質控:1支 30ul  2-8℃下保存至使用。要長時間儲存,將其分裝于小瓶里,在-70℃下儲存。
  • 洗滌液(10X):1瓶 120ml  2-8℃下保存至使用。
  • EnWash:1瓶 20ml 2-8℃下保存至使用。
  • 酶聯物:一瓶6ml 即用 2-8℃下保存至使用。
  • TMB底物液: 1支 9ml 即用  2-8℃下保存至使用。
  • 終止液;1支6ml 即用  2-8℃下保存至使用。

試劑應避免反復凍融。

西尼羅河病毒熒光玻片法檢測試劑盒

西尼羅河病毒熒光玻片法檢測試劑盒

西尼羅河間接免疫熒光法檢測試劑盒

西尼羅河間接免疫熒光法檢測試劑盒

熱帶病西尼羅河抗原檢測試劑

熱帶病西尼羅河抗原檢測試劑

結核分枝桿菌抗體檢測試劑盒(金標法)

操作步驟:

  • 標記將要使用的板條,注意微孔板已經按照統一排列,如下所述包被西尼羅抗原和質控抗原。

西尼羅抗原

 

板條#1

板條#2

A

WNRA

WNRA

B

WNRA

WNRA

C

WNRA

WNRA

D

WNRA

WNRA

E

NCA

NCA

F

NCA

NCA

G

NCA

NCA

H

NCA

NCA

  • 將血清樣品﹑陰性質控和陽性質控同樣地用樣每孔加入50ul稀釋后的樣品,以下為一個血清樣品使用一個板條的*。
  • 品稀釋液按1:300稀釋。

 

 

板條1

板條2

血清樣品

A

IgG N

樣品1

B

IgG N

樣品1

C

IgG P

樣品2

D

IgG P

樣品2

E

IgG P

樣品2

F

IgG P

樣品2

G

IgG N

樣品1

H

IgG N

樣品1

 

  • 封板,在濕潤的溫育器里37下溫育1小時。
  • 溫育后,用自動洗板機,使用洗滌液洗板6次。
  • 在每孔中加入50ul的酶聯物。
  • 封板,在濕潤的溫育器里37下溫育1小時。
  • 溫育后,用自動洗板機,使用洗滌液洗板6次。
  • 每孔加入150ul的EnWash,在室溫下溫育5分鐘
  • 溫育后,用自動洗板機,使用洗滌液洗板6次。
  • 每孔加入75ul的TMB底物液。
  • 封板,在室溫下,避光處溫育10分鐘。
  • 每孔加入50ul的終止液終止反應。
  • 在450nm處讀取吸光率。

結果的計算

結果的變化將會非常大,以下結果僅供指引。

計算ISR值:

計算在同一實驗里WNR抗原的兩個陰性質控的平均值,計算同一實驗里NC抗原的兩個陰性質控的平均值,用WNRA/NCA,得出陰性質控的ISR值。同樣地計算陽性質控和樣品得ISR值,陽性質控的ISR值應高于3.0,陰性質控的ISR值應低于1.5。

結果的判斷:

ISR

結果

解釋

≤2.0

陰性

沒有檢測到IgG抗體

2.0-3.0

可疑

需確證實驗

≥3.0

陽性

存在IgG抗體,建議做確定性實驗




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肺炎鏈球菌也可侵入機體其它部位,引起繼發性  胸膜炎、中耳炎、乳突炎、心內膜炎及化膿性腦膜炎等。  細菌免疫性編輯肺炎鏈球菌感染后,機體可建立較牢固的  型特異性免疫,同型病菌的再次感染少見?;颊甙l病后5~  6天,體內可形成莢膜多糖型特異性抗體。這種抗體與莢膜  結合后,肺炎鏈球菌易被機體吞噬細胞吞噬殺滅。補體在  清除病原菌過程中發揮調理作用,當抗原抗體復合物與補  體結合后,可增強吞噬細胞對病原菌的吞噬功能。標本采  集包括痰、膿液、血液、腦脊液等標本。涂片染色鏡檢革  蘭氏色染色呈陽性球菌,呈矛頭狀成雙排列,坦面相鄰,  *向外。若標本可見大量炎性細胞同時存在時有重要的  參考價值。莢膜染色陽性。分離培養常采用羊血平板,有  助于其溶血特征的識別和進一步鑒定,而且初代分離應置  5%~10%CO2的環境下培養。在血平板上,肺炎鏈球菌的菌落  直徑0.5~1.5mm,灰白色、半透明、表面光滑(有些菌株可  表現為粘液狀)扁平,周圍環繞著草綠色溶血環。培養或  放置24h以上的培養物還會由于肺炎鏈球菌的自溶作用而致  菌落中央塌陷而邊緣隆起,而呈臍窩狀。鑒定試驗① 膽汁  溶菌試驗:本試驗的原理基于膽鹽能夠通過活化肺菌的自  溶酶而溶解肺炎鏈球菌,但不能溶解草綠色鏈球菌。

    
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