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真菌藥敏紙片使用說明書

時間:2016/7/25閱讀:4795
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【產品名稱】真菌藥敏紙片

【預期用途】用于體外抗真菌藥物敏感性試劑

【檢驗原理】藥敏紙片含有的藥物經溶解向培養基周圍擴散,形成同心圓濃度梯度,在一定濃度范圍內可抑制待測菌的生長,形成抑菌環。該抑菌環直徑的大小與該抗菌藥物的zui低抑菌濃度(MIC)成反比,即通過紙片擴散試驗所測的抑菌環直徑的大小。參照《全國臨床檢驗操作規程》可判斷該藥物對待測菌敏感、中介或耐藥情況。

【主要組成成份】直徑為9.2mm的藥檢紙,含微量抗生素的稀釋液。

【型號、規格及質控指標】

【包裝規格】30片/瓶

【儲存條件及有效期】-20℃~8℃避光密封條件下貯存,有效期為十二個月。

【樣本要求】待測菌應為生長在無選擇性瓊脂平板上的新鮮純菌落。

【檢驗方法】a)冰箱內取出紙片瓶需放置恒溫后方可打開,防止冷熱水凝結使紙片受潮。b)用接種環挑取經18h~24h培養的新鮮菌落于3~10ml無菌接種水內,對于大多數菌株,菌液濃度調成0.5麥氏濁度即可;克柔念珠菌應再稀釋5倍;隱球菌屬調成1.0麥氏濁度。菌液濃度的控制是重要的,過濃會導致吡咯類抑菌圈判定,出現假陰性。c)用無菌棉拭子沾取菌液,并經管壁旋轉擠壓去除過多的菌液后,均勻涂抹接種于NCCLS推薦的RPMI-1640平板,以不用角度涂抹3次,然后沿平皿內緣涂抹一周,蓋上皿蓋,置室溫干燥3~5min后用鑷子將藥敏紙片貼于瓊脂面上(直徑9cm的每平皿可貼4-5片)。紙片貼牢后避免再次移動。d)蓋上蓋子,倒扣置培養箱內孵育(一般為18~24h)后取出。e)用游標卡尺量取抑菌環直徑,對照判讀標準判讀結果。在多數情況下,30~35℃培養18~24小時后可測量抑菌圈直徑,時間過長會使抑菌圈變小而導致假耐藥。如果生長不好,抑菌圈不清(如:新型隱球菌)可適當延長培養時間至抑菌圈清晰為止。

【注意事項】1.對于多烯類抗真菌藥(AMB和NYS),測量生長清晰的抑菌圈,抑菌圈內出現的菌落必須視為耐藥突變株。2.對于吡咯類抗真菌藥(FLU、ITC、MIC、ECO、KET、KET、CLO),在抑菌圈內可能會出現較小的部分被抑菌的菌落。測量時以正常生長的菌落形成的抑菌圈為準,其內部的較小菌落不應視為突變株。3.對于5-氟胞嘧啶(FC),測量生長清晰的抑菌圈,抑菌圈內出現的菌落通常為耐藥突變株。4.抗真菌藥敏平板必須使用NCCLS推薦的RPMI-1640平板。使用其它平板可能會使FC無抑菌圈或抑菌圈減小。其它抗真菌藥敏的抑菌圈也有不同程度的改變。

【參考文獻】第三版《全國臨床檢驗操作規程》

【說明書批準及修改日期】2014年2月

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