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人外周血淋巴細胞的產業化加速升級

時間:2016/6/15閱讀:1314
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    人外周血淋巴細胞的產業化加速升級 
    人外周血淋巴細胞適用于從人抗凝血液中分離單個核細胞,主要為淋巴細胞無菌條件下所分離的細胞可用于免疫學檢測。
    人外周血淋巴細胞包括淋巴細胞和單核細胞等細胞其體積、形態和密度,與其他細胞不同,紅細胞和白細胞等細胞密度較大,為1.090g/ml左右,而人外周血淋巴細胞和單核細胞密度為1.090 g/ml血小板為1.035 g/ml。為此將葡聚糖(右旋糖酐)和泛影酸葡甲胺按一定比例混合調整比重、pH值和滲透壓,經過澄清及除菌過濾后制成一種密度在1.077g/ml并且近于等滲的溶液,經過密度梯度離心使一定密度的細胞按相應密度梯度分布,從而將各種血細胞加以分離。
    取新鮮抗凝血1ml與注射用生理鹽水1:1 混勻后,小心加于2ml的細胞分離液之液面上,以400g離心(半徑15cm水平轉子)20分鐘,此時離心管中由上至下細胞分四層。*層為血漿層。第二層為環狀乳白色淋巴細胞。第三層為透明分離液層。第四層為紅細胞層。收集第二層細胞放入含注射用生理鹽水4-5毫升的試管分混勻后400g離心20分鐘。沉淀經反復洗2次即得所需人外周血淋巴細胞
    常情況下,人外周血中是沒有分裂相的,只有在異常情況下才能發現。植物血球凝集素(PHA)是人類淋巴細胞有絲分裂的刺激劑,在PHA作用下,原處于Go期的淋巴細胞轉化為人外周血淋巴細胞,進而進行有絲分裂。利用PHA這一特性,人外周血淋巴細胞經過含有HPA培養液培養,在體外便可獲得豐富的含有絲分裂的生長活躍的細胞群體,終止分裂中期的淋巴細胞,例可得到所需的人體染色體圖形。具有用血量少、操作簡單等優點。

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