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通用型細胞分離液操作說明

時間:2014/8/12閱讀:1686
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通用型細胞分離液操作說明和使用保存中的注意事項:(各種動物)

本品為帶有乳光或微乳光的滅菌水溶液。主要成分是葡聚糖與泛影酸葡甲胺。適用于從血液

及組織勻漿中(小牛血清懸起勻漿的細胞 1X107/ml)分離所需細胞,在醫療和醫學生物中廣泛

應用。

其他人及動物多種比重細胞分離液。注:因不同種屬不同比重分離液的細胞離散系數及細胞

帶電不同,所以用戶在定制分離液時應提供所需分離液的比重、動物的種屬及被分離細胞的名稱。

使用方法

例:取新鮮抗凝血1ml,與Hank’s 1:1 混勻后,小心加于2ml 的細胞分離液之液面上,以1500

/分離心(半徑15cm 水平轉子)1 分鐘,注:調整離心速度和時間,以下細胞分層可為不同細胞

分層,收集所需細胞層即可,離心管中由上至下細胞分四層。*層;為血漿或組織勻漿液層。

第二層;為環狀乳白色細胞層。第三層;為透明分離液層。第四層;為紅細胞層(此紅細胞層,

表面有懸起的部分白細胞層收集此層細胞即為白細胞。收集第二層的細胞(粒細胞和單核細胞),

放入含 Hank’s 15 毫升的試管中,充分混勻后,以1500-2000 /分離心10 分鐘。吸去上清液,

沉淀經反復洗2 次。用Hank’s 液或小牛血清重新懸起沉淀的細胞(1X107/ml)用相應動物的單

核細胞分離液去除或收集單核細胞備用。(參照淋巴細胞和單核細胞分離方法)其余即為粒細胞,

收集備用。

注意事項

1. 啟封后應置4℃保存避免微生物的污染。 2. 細胞分離液從冰箱取出后,不可立即使用,需待

溶液溫度升至室溫時,搖勻后使用。 3. 整個分離過程中,溫度應控制在18-28℃且在無菌環境

下,避免微生物的污染,否則會影響分離質量。

應 用

-從動物血液及組織中分離淋巴細胞

特點

-密度變化率依照Ficoll 400,泛影酸和氫氧化鈉. -*分離溶液的密度為參照具體產品的標簽

-生理學參數-在低粘度時高密度-無菌-即用型-溶液

產品規格

溶液 水

PH 7.0-7.5

滲透壓 280-340mOsmol/kg

內毒素 <5EU/ml

無菌 已檢測

保存期限 2 

貯藏 +18-+25

注 意

TBD 實驗室的細胞分離培養基是敏光型的。這種培養基在運輸和貯藏過程中應避光保溫。由于

各品牌離心機的性能不同,國內南北地區溫度環境和四季的差異,可能影響分離效果,用戶可以

調節離心轉數,調節離心的時間,摸索*的分離條件(具體分離條件各實驗室自定)。組織,

血液,細胞要求新鮮,避免冷凍和冷藏。

貯 藏

18-25℃避光保存。啟封后置4℃保存。本品為真空包裝,未啟封前置于10℃ 以下易出現白色結

晶,影響分離效果。

通用型細胞分離液的比重調整:

制備幾種不同的細胞分層液:40%42.5%45%47.5% 50%52.5%55%57.5% 60%

62.5% 65%67.5%70%75%80%

0.1mol PBS PH7.2 稀釋配制)

40% LTS113分離液比重約為 : 1.0550

42.5% LTS113分離液比重約為 : 1.0580

45% LTS113分離液比重約為 : 1.0610

47.5% LTS113分離液比重約為 : 1.0650

50% LTS113分離液比重約為 : 1.0670

52.5% LTS113分離液比重約為 : 1.0700

55% LTS113分離液比重約為 : 1.0730

57.5% LTS113分離液比重約為 : 1.0760

60% LTS113分離液比重約為 : 1.0780

62.5% LTS113分離液比重約為 : 1.0800

65% LTS113分離液比重約為: 1.0830

67.5% LTS113分離液比重約為: 1.0850

70% LTS113分離液比重約為 : 1.0875

75% LTS113分離液比重約為 : 1.0920

80% LTS113分離液比重約為 : 1.1000

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