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黃酒中氨基甲酸乙酯含量檢測-20g樣品

閱讀:2178      發布時間:2012-7-9
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1 儀器及材料
儀器:Agilent GC-MS 7890-5975c;渦旋混合器;旋轉蒸發儀;
玻璃器皿:30mL樣品瓶;200mL雞心瓶;容量瓶;進樣樣品瓶;
材料及試劑:氨基甲酸乙酯凈化柱;氨基甲酸乙酯標準品;PTFE濾膜;二氯甲烷、甲醇均為色譜純;無水硫酸鈉(經600度煅燒);

2 標準溶液配制

準確稱取約0.1g(至0.0001g)氨基甲酸乙酯標準品于100mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,得到標準儲備液。用甲醇逐級稀釋儲備液,得到2010510.10.05(單位為μg/mL)標準溶液,用于繪制標準曲線。同時稀釋得到標準工作液4μg/mL40μg/mL400μg/mL,用于進行加標回收率實驗。

3 GC-MS操作條件

3.1 GC條件
毛細柱DA-INOWAX30m*0.25mm*0.25um);進樣口溫度230;載氣:高純氦氣;流速1ml/min;程序升溫:605min3.5/min 150;不分流進樣,進樣量1μL
3.2 MS條件
接口溫度:240,電離方式:EI,電子能量:70eV,離子源溫度:230,四級桿溫度:150;掃描模式:SIM模式,監測離子:62,74,89,其中定量離子為62.

4 樣品處理

4.1 黃酒加標樣品
稱取20g黃酒于30mL樣品瓶中,加入標準工作液0.1mL,渦旋混合均勻,將樣品載入到凈化柱上,靜置10min以保證黃酒樣品和填料充分濕潤。用3*40mL二氯甲烷洗脫,每次間隔1-3min,用雞心瓶收集洗脫液,將洗脫液在40下旋轉蒸發至約1mL,轉移溶液至帶刻度試管中,用2*1mL甲醇洗滌雞心瓶,將洗滌液也轉移至試管中進行合并,并用甲醇定容至4mL,加入少量無水硫酸鈉,靜置5min,用PTFE濾膜進行過濾,收集,取少量入進樣樣品瓶,待測。
4.2 黃酒樣品
量取20g黃酒,將樣品載入到凈化柱上,往下操作步驟同4.1(將樣品載入到凈化柱上,靜置……)。
4.3 空白樣品
量取20g去離子水,將樣品載入到凈化柱上,往下操作步驟同4.1(將樣品載入到凈化柱上,靜置……)。

5 實驗結果

色譜圖
將處理得到的樣品在儀器條件(3)下進行檢測,得到的色譜圖如圖1~3.

 

1 標準溶液色譜圖(濃度為1μg/mL

 

2 黃酒樣品加標色譜圖(定容濃度為1μg/mL

 

3 黃酒樣品色譜圖

標準曲線

將步驟(2)配制的標準溶液,在儀器條件(3)下進行檢測,繪制標準曲線,得到線性方程為y=2.19e+005*x+4.40e+003(相關系數為0.999),其中y為峰面積,x為目標物濃度(μg/mL),方法檢出限為3ng/mL,定量限為10ng/mL

加標回收率及精密度

稱取1720g酒樣,其中5份分別加入濃度為4μg/mL標準工作液0.1mL5份分別加入濃度為40μg/mL標準工作液0.1mL,另外5份分別加入濃度為400μg/mL標準工作液0.1mL,余下2份酒樣作為空白,在條件(4)下進行樣品處理,將得到的樣品在儀器條件(3)下進行檢測,結果如表1所示。

1 加標回收率及精密度

加標濃度/μg/mL
NO.2
NO.3
NO.4
NO.5
平均回收率
RSD(n=5)
0.02
87.20%
96.70%
110.50%
90.70%
95.20%
96.06%
9.27%
0.2
99.20%
91.10%
89.40%
88.10%
97.20%
93.00%
5.29%
2
88.80%
89.10%
90.30%
95.70%
86.50%
90.08%
3.81%

計算公式

樣品中氨基甲酸乙酯的含量(X)以mg/kg表示,按式(1)計算:
X=C1-C2*V/m…………………………..1
式中:
C1為試樣中氨基甲酸乙酯的含量,單位為μg/mL
C2為空白試樣氨基甲酸乙酯的含量,單位為μg/mL
V為試樣zui終定容體積,單位為mL
m為稱取試樣的質量,單位為g

6 結論

實驗結果表明,該凈化柱對氨基甲酸乙酯能有較好的回收率,同時,使用該凈化柱能較好的去除酒中的氨基酸、蛋白質、糖、有機酸等干擾成分。該方法黃酒用量為20g,洗脫劑用量為120mL,對氨基甲酸乙酯含量較低的酒樣能有較高的富集倍數,該方法實驗操作快速、簡便,可應用于大批量樣品的前處理。

附錄一

實驗中所用耗材訂貨號見表2

2 耗材及訂貨號

耗材
貨號
氨基甲酸乙酯凈化柱
EC2000060
30mL樣品瓶
2409-0839
進樣樣品瓶
1109-0259
PTFE濾膜
AM041320
DA-INOWAX
2025-3002
 

附錄二

針對氨基甲酸乙酯含量較高的樣品,可以減少取樣量,具體方法如下:

稱取2g黃酒于10mL樣品瓶中,加入標準工作液50μL,渦旋混合均勻,將樣品載入到凈化柱上,靜置10min以保證黃酒樣品和填料充分濕潤。然后用12mL二氯甲烷洗脫,用流速調節閥控制流速為2 mL/min左右,用帶刻度試管收集洗脫液,將洗脫液在30下氮吹至1mL(若體積小于1mL可以用二氯甲烷定容至1mL),加入少量無水硫酸鈉,靜置5min,用PTFE濾膜進行過濾,收集,取少量入進樣樣品瓶,待測。

對應于2g樣品的凈化柱的貨號為:EC20006

其他測試方法同20g取樣量的方法。完整方法鏈接請點擊 這里

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