資料簡介
雌三醇-雞卵清白蛋白偶聯物(Estriol-OVA Conjugate,E3-OVA)是一種通過化學交聯技術將雌三醇(Estriol,E3)與雞卵清白蛋白(Ovalbumin,OVA)結合形成的復合物,在生物醫學研究和免疫檢測中具有重要應用價值。以下從組成、制備方法、特性、應用及儲存條件五個方面進行詳細介紹:
一、組成與結構
雌三醇(E3):天然存在的雌激素,是體內雌二醇的代謝物。
雞卵清白蛋白(OVA):蛋清中的主要蛋白組分,占蛋清蛋白總量的54%~69%,分子量約為44.5kDa,是一種含磷糖蛋白,具有高度的二級結構(如α-螺旋和β-折疊)。
偶聯物(E3-OVA):通過化學交聯方法將雌三醇與OVA結合,形成穩定的復合物,保留了雌三醇的抗原性和OVA的載體功能。
二、制備方法
混合酸酐法:雌三醇上的羧基在正丁胺存在下與氯甲酸異丁酯反應,形成混合酸酐中間體,再與OVA的氨基反應,形成偶聯物。
碳二亞胺法(EDC法):碳二亞胺(EDC)使雌三醇的羧基與OVA的氨基脫水形成酰胺鍵,生成穩定的偶聯物。
戊二醛法:雙功能試劑戊二醛的兩個醛基分別與雌三醇和OVA的氨基形成Schiff鍵,在兩者間引入一個5碳橋。該方法反應條件溫和(4~40°C,pH6.0~8.0),操作簡便,應用廣泛。
三、核心特性
抗原性:E3-OVA偶聯物具有抗原性,可作為抗原免疫動物,制備抗雌三醇的特異性抗體。
免疫檢測活性:可包被于固相載體(如酶標板)上,用于雌三醇及其抗體的免疫檢測(如ELISA),經稀釋后效價≥1:5000。
生物活性:保留了雌三醇的部分生物活性。
穩定性:溶于PBS(pH7.4)等緩沖液,蛋白濃度≥1mg/ml,含穩定劑(如BSA)以防止變性。
四、應用領域
抗體制備:作為免疫原免疫動物,制備抗雌三醇抗體,用于研究雌三醇的生理功能(如對生殖系統、內分泌系統的調節作用)及疾病狀態下的水平變化。
免疫檢測:建立ELISA等方法,定量檢測血清、血漿、尿液等生物樣本中的雌三醇濃度,為臨床診斷、疾病監測和藥物療效評估提供依據。
藥物研發:作為標準品或對照品,評估藥物的活性和特異性(如藥物與雌三醇受體的結合能力、親和力),篩選和優化藥物。
生物醫學研究:研究雌三醇的病理作用,開發針對雌激素相關疾病的診斷方法和治療策略。
藥物載體研究:利用雌三醇對特定組織或細胞的靶向性,實現藥物的定向遞送,提高療效并減少副作用。
五、儲存條件與注意事項
溫度:建議-20℃或以下低溫保存,避免反復凍融或于4℃以上久置,以防止雌三醇降解或OVA變性。
操作規范:僅供科研使用,不可用于人體;操作時需佩戴防護裝備,避免直接接觸皮膚或眼睛。
安全性:雌三醇為激素類物質,需嚴格遵守實驗室安全規范,防止污染和浪費。
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