兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒實驗使用說明書

　　以下是兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒的實驗使用說明書綜合整理：

　　BS-4199 兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒

　　一、實驗原理?

　　采用雙抗體夾心法檢測樣本中iFABP含量：

　　包被抗iFABP抗體的微孔板捕獲樣本中的iFABP;

　　加入生物素化抗體與HRP標(biāo)記的親和素形成復(fù)合物;

　　TMB底物顯色(藍(lán)色→黃色)，顏色深度與iFABP濃度正相關(guān)。

　　二、試劑盒組成?

　　48孔/96孔配置?：

　　預(yù)包被微孔板

　　標(biāo)準(zhǔn)品(225 nmol/L)及稀釋液

　　酶標(biāo)試劑(HRP標(biāo)記)

　　洗滌緩沖液、TMB顯色液、終止液

　　封板膜、說明書

　　三、實驗步驟?

　　樣本準(zhǔn)備?：

　　血清/血漿：離心去除顆粒(1000×g，10分鐘);

　　細(xì)胞上清液或組織勻漿：離心后取上清。

　　操作流程?：

　　將試劑平衡至室溫(30分鐘);

　　加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本(100μL/孔)，4℃過夜孵育;

　　洗滌7次后加入酶標(biāo)抗體(100μL/孔)，4℃孵育30分鐘;

　　洗滌9次，加入TMB顯色(避光30分鐘);

　　終止反應(yīng)后30分鐘內(nèi)測定450nm OD值。

　　四、注意事項?

　　樣本處理?：避免溶血或反復(fù)凍融，-70℃長期保存;

　　洗滌?：拍干微孔板，防止殘留液體干擾;

　　顯色?：底物避光保存，終止后及時檢測;

　　質(zhì)量控制?：每批次實驗需包含空白對照和標(biāo)準(zhǔn)曲線。

　　五、結(jié)果計算?

　　以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線，通過擬合方程計算樣本濃度。

　　六、技術(shù)參數(shù)?

　　靈敏度?：批內(nèi)/批間變異系數(shù)<10%;

　　檢測范圍?：參考標(biāo)準(zhǔn)品梯度(如1-225 nmol/L);

　　保存條件?：2-8℃保存，部分試劑需-20℃長期存儲。

　　注：以上資料僅供參考，如需完整說明書代測服務(wù)，可聯(lián)系供應(yīng)商獲取。

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