一、引言

隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，實(shí)時熒光定量PCR（qPCR）已成為基因表達(dá)分析、病原體檢測、SNP 分型、拷貝數(shù)變異等研究和臨床診斷的重要工具。羅氏（Roche）生產(chǎn)的實(shí)時熒光定量PCR儀以其穩(wěn)定的溫度控制系統(tǒng)、靈敏的熒光探測模塊以及完善的軟件平臺而獲得廣泛認(rèn)可。本文圍繞一臺二手羅氏實(shí)時熒光定量PCR儀，從設(shè)備概覽、主要性能、技術(shù)優(yōu)勢、典型應(yīng)用、操作維護(hù)、使用案例和售后支持等方面進(jìn)行詳細(xì)介紹。

二、設(shè)備概覽

二手羅氏實(shí)時熒光定量PCR儀保留了原廠出廠時的全部核心組件，采用了模塊化設(shè)計。儀器外觀結(jié)構(gòu)與全新機(jī)型一致，由機(jī)箱主機(jī)、光學(xué)檢測系統(tǒng)、觸摸屏控制單元以及配套電源組成。主機(jī)內(nèi)部包括精準(zhǔn)的熱循環(huán)模塊和多通道熒光探測器，可支持 FAM、HEX/VIC、ROX、Cy5 等常見熒光染料。配合羅氏專用軟件，可一次性檢測多達(dá) 96 個樣本，每個樣本可進(jìn)行 1–5 個通道的數(shù)據(jù)采集與分析。

三、主要性能參數(shù)

1. 溫控精度： ±0.1 ℃；

2. 溫度均一性： ≤ 0.3 ℃；

3. 升降溫速率： 5 ℃/s（從 60 ℃ 到 95 ℃）；

4. 光學(xué)通道： 4 通道；

5. 檢測靈敏度： 可檢出單拷貝水平的核酸；

6. 通量： 96 孔板，支持半板、條管以及單管檢測；

7. 重復(fù)性： Ct 值標(biāo)準(zhǔn)差 ≤ 0.1；

8. 數(shù)據(jù)輸出： CSV、PDF、Excel、圖表等多種格式；

9. 軟件功能： 定性/定量分析、熔解曲線分析、相對定量、絕對定量、SNP 分型等。

四、技術(shù)優(yōu)勢

1. 精確溫控系統(tǒng)

• 采用雙閉環(huán) PID 算法，實(shí)時監(jiān)控模塊溫度，保證反應(yīng)過程中溫度偏差最小化；

• 多點(diǎn)溫度反饋設(shè)計，自動校準(zhǔn)溫差，增強(qiáng)檢測重復(fù)性。

2. 多通道熒光檢測

• 光電探測器靈敏度高，自動背景扣除，信噪比達(dá) 1:1000；

• 通道切換速度快，熒光信號采集時延低于 10 ms。

3. 軟件平臺

• 界面簡潔；反應(yīng)設(shè)置向?qū)Щ瑴p少操作失誤；

• 支持直觀的實(shí)時擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線及熔解曲線分析；

• 內(nèi)置多種分析模板，可自定義報告內(nèi)容及格式。

4. 模塊化設(shè)計

• 可更換光源燈泡與探測器模塊，維修時無需更換整機(jī)；

• 通用電源接口，適應(yīng)寬電壓環(huán)境。

五、典型應(yīng)用場景

1. 基因表達(dá)定量

• 利用熒光標(biāo)記引物或探針，精準(zhǔn)評估基因在不同組織或處理條件下的表達(dá)差異；

2. 病原體快速檢測

• 新冠病毒、流感病毒、結(jié)核分枝桿菌等病原微生物的定性與定量檢測；

3. 轉(zhuǎn)基因作物檢測

• 檢測樣本中轉(zhuǎn)基因片段的存在與數(shù)量；

4. SNP 分型與拷貝數(shù)變異

• 配合特異性探針，實(shí)現(xiàn)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)分型與拷貝數(shù)差異檢測；

5. 臨床診斷與科研

• 腫瘤標(biāo)志物檢測、脫氧核糖核酸甲基化分析、miRNA 表達(dá)譜研究等。

六、操作與維護(hù)

1. 日常開機(jī)檢查

• 檢查電源線與機(jī)箱接口是否緊固；

• 打開軟件，查看系統(tǒng)自檢結(jié)果；

2. 試劑和耗材

• 建議使用羅氏或經(jīng)授權(quán)的兼容品牌試劑盒；

• 96 孔板、光學(xué)封板膜應(yīng)選用低熒光漂白材料；

3. 日常清潔

• 定期用 70% 乙醇清潔樣本架與蓋板；

• 光學(xué)窗口每月檢查一次，如有塵埃用專業(yè)鏡頭紙擦拭；

4. 定期校準(zhǔn)

• 建議每半年進(jìn)行溫度與熒光系統(tǒng)校準(zhǔn)；

• 可聯(lián)系專業(yè)技術(shù)服務(wù)商或?qū)嶒炇覂?nèi)部質(zhì)控組執(zhí)行；

5. 故障處理

• 軟件出現(xiàn)異常時，可重啟主機(jī)或重新安裝軟件；

• 硬件報警提示時，可參考說明書或聯(lián)系售后支持。

七、二手設(shè)備驗收要點(diǎn)

1. 外觀檢查： 無明顯磕碰、劃痕；機(jī)箱固定螺絲完好；

2. 溫控測試： 可通過標(biāo)準(zhǔn)試劑盒或 DNA Ladder 驗證升降溫速率及均一性；

3. 熒光靈敏度測試： 使用低濃度熒光標(biāo)準(zhǔn)品檢測信號變化曲線；

4. 軟件運(yùn)行： 載入模板、編輯程序、導(dǎo)出報告功能正常；

5. 質(zhì)保與配件： 確認(rèn)賣方提供的質(zhì)保期限、電源線、通信線、光學(xué)封板膜等附件是否齊全。

八、典型用戶案例

• 高校科研實(shí)驗室
  某大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院購入此機(jī)型，用于多部門聯(lián)合項目，平均每周運(yùn)行 20 次以上，設(shè)備穩(wěn)定運(yùn)行超過兩年，Ct 值重現(xiàn)性良好。

• 第三方檢測機(jī)構(gòu)
  某檢測中心作為二手回購機(jī)型，引入用于食品安全微生物檢測，月均通量可達(dá) 500 板次，高通量檢測任務(wù)下表現(xiàn)出色。

• 臨床檢驗室
  地市級醫(yī)院分子實(shí)驗室使用該儀器開展呼吸道病毒核酸監(jiān)測，并通過 ISO/IEC 17025 認(rèn)證審核。

九、質(zhì)量保證與售后支持

1. 質(zhì)保范圍

• 核心部件（熱循環(huán)模塊、光學(xué)模塊）承諾 6 個月質(zhì)保；

• 其他配件質(zhì)保 3 個月，質(zhì)保期內(nèi)免費(fèi)更換損壞部件；

2. 技術(shù)培訓(xùn)

• 提供儀器安裝、使用和日常維護(hù)培訓(xùn)；

• 包含軟件操作與常見故障排查指導(dǎo)；

3. 遠(yuǎn)程支持

• 配備遠(yuǎn)程診斷軟件，可實(shí)時監(jiān)控儀器運(yùn)行狀態(tài)；

• 一線工程師在線解答及指導(dǎo)；

4. 現(xiàn)場服務(wù)

• 在簽署服務(wù)協(xié)議后，48 小時內(nèi)安排工程師上門服務(wù)（限國內(nèi)主要城市）；

• 提供定期保養(yǎng)與校準(zhǔn)服務(wù)套餐。

十、總結(jié)

二手羅氏實(shí)時熒光定量PCR儀憑借其精準(zhǔn)的溫控系統(tǒng)、靈敏的熒光檢測能力和完善的軟件分析平臺，能夠滿足科研、臨床及第三方檢測等多種需求。在保證儀器性能的前提下，二手采購不僅節(jié)省投入成本，也可快速上機(jī)開展實(shí)驗。通過嚴(yán)格的驗收流程、規(guī)范的日常維護(hù)及完善的售后服務(wù)，使用者可確保長期穩(wěn)定運(yùn)行，為科研與生產(chǎn)提供可靠的數(shù)據(jù)支持。